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水稻抗病基因Xa3/Xa26家族的表达和生化分析
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水稻抗病基因Xa3/Xa26家族的表达和生化分析
论文目录
 
摘要第1-9 页
ABSTRACT第9-11 页
1 文献综述第11-36 页
　　· 抗病基因的结构和功能第11-13 页
　　　　· 抗病基因的作用机理第11 页
　　　　· 抗病基因的分类第11-13 页
　　· 水稻抗白叶枯病的分子基础第13-16 页
　　　　· 抗白叶枯病基因的分离和克隆第13-14 页
　　　　· Xa3/Xa26基因的克隆和基因家族第14-16 页
　　· 抗病基因家族及其演化第16-18 页
　　　　· 抗病基因家族的特点第16-17 页
　　　　· 抗病基因家族的演化过程第17-18 页
　　　　· Xa3/Xa26基因家族的进化第18 页
　　· 植物受体激酶的结构和功能第18-23 页
　　　　· 植物受体激酶的结构第19-21 页
　　　　· 激酶结构域的特点第21-22 页
　　　　· 植物受体激酶的功能第22-23 页
　　· 植物受体激酶的化学性质第23-26 页
　　　　· 植物受体激酶形成信号复合体第23-24 页
　　　　· 植物受体激酶的自磷酸化现象第24-25 页
　　　　· 植物受体激酶的糖基化现象第25-26 页
　　· 植物受体激酶介导的信号传导途径第26-29 页
　　　　· CLAVATA1介导的信号传导途径第26-27 页
　　　　· SRK介导的信号传导途径第27 页
　　　　· Pto介导的信号传导途径第27-28 页
　　　　· FLS2介导的信号传导途径第28-29 页
　　· 融合蛋白的表达第29-31 页
　　　　· 融合蛋白的原核表达第29-30 页
　　　　· 融合蛋白的真核表达第30-31 页
　　· 生物质谱技术的应用第31-34 页
　　　　· 生物质谱技术的原理第31-32 页
　　　　· 生物质谱技术的分类第32-33 页
　　　　　　· 电喷雾质谱技术第32 页
　　　　　　· 基质辅助激光解吸附质谱技术第32 页
　　　　　　· 快原子轰击质谱技术第32-33 页
　　　　　　· 同位素质谱第33 页
　　　　· 生物质谱技术在蛋白质分析中的应用第33-34 页
　　· 酵母双杂交系统的发展和应用第34-36 页
2 研究目的和意义第36-37 页
3 材料和方法第37-48 页
　　· 总RNA的抽提第37 页
　　· RT-PCR(Reverse transcription-PCR)分析第37-39 页
　　· 融合蛋白的原核表达第39-40 页
　　　　· 表达载体的构建第39-40 页
　　　　· 融合蛋白的表达第40 页
　　　　· 融合蛋白的纯化第40 页
　　· 蛋白激酶自磷酸化分析第40-41 页
　　· 毕赤酵母表达融合蛋白第41-42 页
　　　　· 酵母表达载体的构建第41 页
　　　　· 酵母表达融合蛋白第41-42 页
　　　　· 酵母表达蛋白的浓缩第42 页
　　· Western-blot分析第42-43 页
　　　　· 转膜及染色第42-43 页
　　　　· 封闭滤膜及抗体与靶蛋白的结合第43 页
　　　　· 显色第43 页
　　· 糖基化位点的质谱鉴定第43-44 页
　　　　· 糖蛋白的胶内去糖基化以及酶解第43 页
　　　　· 糖基化位点的质谱分析第43-44 页
　　· 酵母双杂交分析第44-48 页
　　　　· 酵母双杂交载体的构建第44-46 页
　　　　· 检测目标蛋白之间是否互作第46-48 页
4 结果和分析第48-60 页
　　· Xa3/Xa26基因家族成员的表达模式第48-50 页
　　· TRka基因区段融合蛋白(TRKaP)，Xa3/Xa26基因LRR区(Xa3L/Xa26L)和激酶区融合蛋白(Xa3K/Xa26K)的原核表达第50-53 页
　　· Xa3K/Xa26K没有自磷酸化现象第53 页
　　· 毕赤酵母表达XA3/XA26融合蛋白第53-56 页
　　· 利用质谱技术分析XA3/XA26的糖基化位点第56-59 页
　　· XA3/XA26与MRKa，MRKc及其本身的互作关系第59-60 页
5 讨论第60-68 页
　　· Xa3/Xa26基因家族成员的表达分析第60-61 页
　　· 优化原核表达融合蛋白的探讨第61-63 页
　　　　· 选择合适的pET载体第61 页
　　　　· 蛋白表达过程中的调控第61-62 页
　　　　· 诱导表达过程中具体条件的优化第62 页
　　　　· 蛋白毒性对蛋白产量的影响第62-63 页
　　· 激酶自磷酸化现象的探讨第63-64 页
　　· 酵母表达融合蛋白的探讨第64-65 页
　　· 质谱分析激酶糖基化现象第65-66 页
　　· 激酶信号传导途径的探讨第66-68 页
参考文献第68-82 页
致谢第82 页

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