论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-5
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| Abstract | 第5-12
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| 第一章 文献综述 | 第12-28
页 |
| 1 昆虫的生物钟 | 第12-17
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| · 昆虫生物钟的种类 | 第12
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| · 昆虫的生物钟基因 | 第12-14
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| · 果蝇的昼夜节律及分子机制 | 第14-17
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| · 果蝇昼夜生物钟输入途径 | 第15
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| · 果蝇分子钟的反馈环路 | 第15-17
页 |
| · 果蝇昼夜生物钟的输出 | 第17
页 |
| 2 隐花色素研究进展 | 第17-25
页 |
| · cry基因的结构和进化历史 | 第18-19
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| · CRY蛋白的结构特点 | 第19-21
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| · 不同生物CRY的细胞定位与功能 | 第21-25
页 |
| · 果蝇CRY | 第21
页 |
| · 哺乳动物CRY | 第21-22
页 |
| · 拟南芥CRY | 第22-23
页 |
| · CRY1与CRY2的功能差异 | 第23-25
页 |
| 3 光照与温度对昆虫生物节律的影响 | 第25-28
页 |
| · CRY蛋白在光照机制中的作用 | 第26
页 |
| · CRY与PER:TIM复合体在温度诱导中的相互作用 | 第26
页 |
| · 光照和温度对生物钟的协同作用 | 第26-27
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| · 家蚕在研究温度诱导机制中的应用前景 | 第27-28
页 |
| 第二章 Bm-cry1和Bm-cry2基因的电子克隆 | 第28-39
页 |
| 1 材料与方法 | 第28-29
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| · 实验材料 | 第28-29
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| · 序列信息 | 第28
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| · 软件工具 | 第28-29
页 |
| · 方法 | 第29
页 |
| 2 结果与分析 | 第29-33
页 |
| · Bm-cry1基因的电子克隆 | 第29-30
页 |
| · Bm-cry2基因的电子克隆 | 第30-33
页 |
| 3 讨论 | 第33-39
页 |
| · 电子克隆Bm-cry基因序列的可靠性 | 第33-34
页 |
| · CRY1和CRY2的保守性 | 第34-39
页 |
| 第三章 Bm-cry1和Bm-cry2的实验克隆和序列分析 | 第39-63
页 |
| 1 材料与方法 | 第39-45
页 |
| · 材料 | 第39-40
页 |
| · 生物材料 | 第39
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| · 主要试剂 | 第39-40
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| · 方法 | 第40-45
页 |
| · 引物设计 | 第40-42
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| · 家蚕头部总RNA提取 | 第42
页 |
| · cDNA合成 | 第42-43
页 |
| · PCR反应体系及条件设置 | 第43
页 |
| · 3'RACE和5'RACE PCR反应 | 第43
页 |
| · 目的基因cDNA回收 | 第43
页 |
| · 连接反应 | 第43-44
页 |
| · 感受态细胞制备 | 第44
页 |
| · 连接产物转化 | 第44
页 |
| · 重组质粒筛选 | 第44
页 |
| · 质粒DNA制备 | 第44-45
页 |
| · 生物信息学资源及分析软件 | 第45
页 |
| 2 结果与分析 | 第45-61
页 |
| · RT-PCR反应及酶切鉴定 | 第45-47
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| · Bm-cry1的PCR反应及酶切鉴定 | 第45
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| · Bm-cry2的PCR反应及酶切鉴定 | 第45-47
页 |
| · 电子克隆序列(大造)与实验克隆序列(C108)比对 | 第47-49
页 |
| · Bm-cry1的比对结果 | 第47
页 |
| · Bm-cry2的比对结果 | 第47-49
页 |
| · Bm-cry2的RACE PCR结果 | 第49-51
页 |
| · 蛋白序列分析 | 第51-54
页 |
| · 分子量等电点分析 | 第51
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| · 信号肽分析 | 第51
页 |
| · 跨膜区预测 | 第51-53
页 |
| · 二级结构预测 | 第53
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| · 蛋白功能域(保守区)分析 | 第53-54
页 |
| · 蛋白功能位点分析 | 第54
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| · 蛋白质同源性和分子进化分析 | 第54-61
页 |
| · 蛋白同源性分析 | 第54-59
页 |
| · 分子进化分析 | 第59-61
页 |
| 3 讨论 | 第61-63
页 |
| · 序列克隆 | 第61
页 |
| · 序列分析 | 第61
页 |
| · 分子进化 | 第61-63
页 |
| 第四章 Bm-cry2基因的时空表达 | 第63-76
页 |
| 1 材料和方法 | 第63-67
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| · 生物材料 | 第63-65
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| · 实验药品 | 第65
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| · 试验设备 | 第65-66
页 |
| · 研究方法 | 第66-67
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| · 引物设计 | 第66
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| · 总RNA提取 | 第66
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| · Reverse Transcription-PCR反应 | 第66-67
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| · PCR反应条件 | 第67
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| 2 结果与分析 | 第67-73
页 |
| · 不同循环数对家蚕Actin3、cry2基因扩增效率的影响 | 第67
页 |
| · 家蚕卵不同孵化条件对Bm-cry2基因表达的影响 | 第67-70
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| · Bm-cry2的卵孵化期逐日表达结果 | 第67-68
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| · Bm-cry2的卵孵化敏感时期表达结果 | 第68-70
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| · 家蚕不同孵化条件对次代卵Bm-cry2基因表达的影响 | 第70-73
页 |
| · 浸酸活化对次代滞育卵Bm-cry2基因表达的影响 | 第70
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| · 孵化温度对次代卵Bm-cry2基因表达的影响 | 第70-71
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| · 孵化光照对次代卵Bm-cry2基因表达的影响 | 第71-73
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| · 光照和温度协同作用对次代卵Bm-cry2基因表达的影响 | 第73
页 |
| · 家蚕Bm-cry2基因在家蚕幼虫不同组织的表达差异 | 第73
页 |
| 3 讨论 | 第73-76
页 |
| · 滞育诱导发生孵化条件对家蚕卵Bm-cry2表达的影响 | 第73-74
页 |
| · 家蚕不同滞育诱导发生孵化条件对次代卵Bm-cry2基因表达的影响 | 第74-75
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| · Bm-cry2在家蚕幼虫不同组织的表达差异 | 第75-76
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| 第五章 综合结论 | 第76-78
页 |
| 1 Bm-cry1和Bm-cry2基因克隆和序列分析 | 第76
页 |
| 2 滞育诱导环境对Bm-cry2基因表达的影响 | 第76-77
页 |
| 3 Bm-cry2基因在家蚕幼虫不同组织中的表达差异 | 第77-78
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| 参考文献 | 第78-86
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| 研究生期间发表文章 | 第86-87
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| 论文资助项目 | 第87-88
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| 附录 | 第88-96
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| 致谢 | 第96
页 |
