玉米CMS-S育性相关线粒体蛋白质的研究
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玉米CMS-S育性相关线粒体蛋白质的研究
论文目录
摘要
第1-9页
Abstract
第9-11页
缩略语
第11-12页
1 前言
第12-25页
· 雄性不育简介
第12-13页
· 雄性不育的现象
第12页
· 雄性不育的分类
第12-13页
· 雄性不育的意义
第13页
· 线粒体的功能
第13-23页
· 线粒体嵌合基因与CMS
第13-16页
· 线粒体中RNA编辑与CMS
第16-19页
· 线粒体中RNA编辑
第16-18页
· CMS相关基因的RNA编辑
第18-19页
· 线粒体育性相关蛋白质
第19-21页
· 线粒体反向调节信号与CMS
第21-23页
· 线粒体反向调控细胞程序化死亡与CMS
第21-22页
· 线粒体反向调控与花器官的同源转化
第22-23页
· 核恢复基因的调控
第23-24页
· 研究目的
第24-25页
2 育性相关蛋白的原核表达
第25-50页
· 材料与试剂
第25页
· 原核表达载体的引物
第25-27页
· 原核表达方法
第27页
· 外源片段的扩增
第27页
· 质粒和PCR产物的酶切、回收
第27页
· 外源片段的连接、转化及检测
第27-28页
· 菌体诱导曲线、蛋白质检测、菌体荧光的观察
第28页
· 结果分析
第28-50页
· 原核表达载体基因克隆
第28-30页
· 原核表达载体的检测
第30-37页
· pET-28a系列载体的检测
第30-32页
· EGFP C端融合载体的检测
第32-34页
· pET-28a-egfp及egfp N端融合载体的检测
第34-35页
· 内含肽C端融合载体的检测
第35-37页
· 原核表达载体菌体诱导曲线
第37-40页
· pET-28a载体诱导曲线
第37-38页
· EGFP C端融合载体诱导曲线
第38页
· EGFP N端融合载体诱导曲线
第38-39页
· 内含肽C端融合载体诱导曲线
第39-40页
· 原核表达SDS-PAGE检测
第40-43页
· pET-28a载体SDS-PAGE检测
第40-41页
· EGFP C端融合载体SDS-PAGE检测
第41-42页
· 内含肽C端融合载体SDS-PAGE检测
第42-43页
· 菌体荧光图的观察
第43-47页
· 对照载体及EGFP C端融合载体菌体荧光图
第44-46页
· egfp N端融合载体菌体荧光图
第46-47页
· EGFP C端融合蛋白质谱
第47-50页
3 育性相关蛋白的洋葱表皮瞬时表达
第50-57页
· 材料与方法
第50页
· 瞬时表达载体引物
第50页
· 瞬时表达载体的构建
第50-51页
· 目的基因的扩增
第50页
· 质粒pEGAD和PCR片段酶切、回收
第50-51页
· 目的基因的连接、转化及检测
第51页
· 洋葱表皮瞬时表达
第51页
· 结果与分析
第51-57页
· 目的基因的克隆及检测
第51-54页
· ORF77、ORF355性质及结构的预测
第54-55页
· 激光共聚焦显微观察
第55-57页
4 讨论
第57-61页
· 玉米CMS-S相关基因表达
第57页
· 原核表达系统
第57-59页
· 真核表达系统
第59页
· orf355蛋白质的性质
第59-61页
5 展望
第61-62页
参考文献
第62-75页
致谢
第75-76页
附录
第76-84页
附录1 常用培养基和溶液的配制
第76-77页
附录2 提取质粒(小样法)
第77页
附录3 电转化感受态的制备
第77-78页
附录4 电转化
第78页
附录5 热激钙转化
第78页
附录6 凝胶回收DNA片段
第78-79页
附录7 大样法抽提高浓度质粒
第79页
附录8 植物总DNA的小量提取(CTAB法)
第79-80页
附录9 SDS-PAGE电泳
第80-81页
附录10 基因枪使用方法
第81-82页
附录11 玉米CMS-S育性相关基因
第82-83页
附录12 EGFP序列
第83页
附录13 atp9序列
第83页
附录14 or17、orf60、orf77、atp9、EGFP的PCR扩增程序及扩增条件
第83-84页
附录15 orf355的PCR扩增程序及扩增条件
第84页
附录16 限制性内切酶的酶切体系
第84页
附录17 T4 DNA ligase反应体系
第84 页
本篇论文共
84
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