论文目录 | |
| 英文缩略词表 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 第一章 西尼罗病毒抗体间接ELISA检测方法的建立及应用 | 第14-30页 |
| · 材料 | 第14-16页 |
| · 主要仪器设备 | 第14页 |
| · 主要试剂 | 第14-15页 |
| · 血清 | 第15页 |
| · 主要试验试剂的配制 | 第15-16页 |
| · 方法 | 第16-23页 |
| · 引物的设计与合成 | 第16页 |
| · WNV-EDIII基因的扩增及克隆 | 第16-19页 |
| · 重组表达质粒的构建及鉴定 | 第19-21页 |
| · WNV-EDIII重组蛋白最佳诱导时间及表达形式的确定 | 第21页 |
| · Western blot检测 | 第21页 |
| · WNV-EDIII蛋白的纯化 | 第21-22页 |
| · 间接ELISA检测方法的建立 | 第22页 |
| · 间接ELISA检测方法判定标准的确定 | 第22页 |
| · 间接ELISA检测方法性能评价 | 第22-23页 |
| · WNV疫苗免疫效果的评价 | 第23页 |
| · 结果 | 第23-28页 |
| · WNV-E DIII基因的扩增 | 第23-24页 |
| · 重组质粒pG-E DIII的鉴定 | 第24页 |
| · 目的蛋白的SDS-PAGE检测 | 第24-25页 |
| · 目的蛋白的Western blot鉴定 | 第25页 |
| · 目的蛋白的纯化 | 第25-26页 |
| · 间接ELISA检测方法的建立 | 第26页 |
| · 间接ELISA检测方法性能评价 | 第26-27页 |
| · 马匹WNV疫苗免疫效果的评价 | 第27-28页 |
| · 讨论 | 第28-29页 |
| · 小结 | 第29-30页 |
| 第二章 西尼罗病毒核酸检测荧光定量PCR方法的建立及评价 | 第30-37页 |
| · 材料 | 第30页 |
| · 主要仪器设备 | 第30页 |
| · 主要试剂 | 第30页 |
| · 方法 | 第30-32页 |
| · 引物的设计与合成 | 第30-31页 |
| · 引物及探针的鉴定 | 第31页 |
| · 标准曲线的绘制 | 第31-32页 |
| · Real-time RT-PCR方法性能评价 | 第32页 |
| · 结果 | 第32-35页 |
| · 模板RNA的浓度测定 | 第32-33页 |
| · 引物与探针浓度及扩增反应各条件的优化 | 第33页 |
| · 标准曲线建立和Real-time RT-PCR的灵敏性 | 第33-34页 |
| · Real-time RT-PCR的准确性和重复性 | 第34页 |
| · Real-time RT-PCR的特异性 | 第34-35页 |
| · Real-time RT-PCR与常规PCR的比较 | 第35页 |
| · 讨论 | 第35-36页 |
| · 小结 | 第36-37页 |
| 第三章 西尼罗病毒RT-LAMP-VF核酸检测方法的建立与评价 | 第37-49页 |
| · 材料 | 第37-38页 |
| · 主要仪器设备 | 第37-38页 |
| · 主要试剂 | 第38页 |
| · 主要试验试剂的配制 | 第38页 |
| · 主要实验动物 | 第38页 |
| · 方法 | 第38-42页 |
| · 病毒及病毒RNA的提取 | 第38页 |
| · RNA标准品的制备 | 第38页 |
| · 引物设计 | 第38-40页 |
| · RT-LAMP-VF反应及产物检测 | 第40-41页 |
| · RT-LAMP-VF方法的特异性和敏感性 | 第41页 |
| · 使用活毒RNA评估RT-LAMP-VF方法 | 第41页 |
| · 使用模拟临床样品评估RT-LAMP-VF方法 | 第41-42页 |
| · 结果 | 第42-46页 |
| · RT-LAMP-VF方法的产物检测 | 第42页 |
| · RT-LAMP-VF方法扩增条件的优化 | 第42-43页 |
| · RT-LAMP-VF方法的特异性 | 第43页 |
| · RT-LAMP-VF方法的敏感性 | 第43-44页 |
| · 使用活毒RNA评估RT-LAMP-VF方法 | 第44页 |
| · 使用模拟临床样品评估RT-LAMP-VF方法 | 第44-46页 |
| · 讨论 | 第46-48页 |
| · 小结 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 导师简介 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
