论文目录 | |
中文摘要 | 第1-5
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英文摘要 | 第5-11
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第一章 文献综述 | 第11-17
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1. 牛乳中免疫球蛋白 | 第11
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2. FcRn 研究进展 | 第11-16
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· FcRn 的分子结构 | 第12
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· FcRn 与IgG 的相互作用 | 第12-13
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· FcRn 的功能作用 | 第13-15
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· FcRn 在胎盘上的作用 | 第13
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· FcRn 在血液循环中的作用 | 第13-14
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· FcRn 在肠道上的作用 | 第14
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· FcRn 在乳腺上的作用 | 第14-15
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· 影响FcRn 表达因素 | 第15-16
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· 激素对FcRn 的影响 | 第15
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· 不同生理阶段对FcRn 的影响 | 第15
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· 基因多态性对FcRn 的影响 | 第15-16
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3 本研究的意义 | 第16-17
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第二章 奶牛 FcRn α链基因启动子 SSCP 多态性研究 | 第17-23
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1 材料与方法 | 第17-19
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· 试验材料采集 | 第17
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· 主要试剂 | 第17-18
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· 主要仪器设备 | 第18
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· 引物的设计和PCR 扩增 | 第18
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· PCR 产物的克隆和测序 | 第18-19
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· PCR-SSCP 法检测单核苷酸多态 | 第19
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· 数据的统计处理 | 第19
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2 结果与分析 | 第19-21
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· PCR 产物 | 第19
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· PCR-SSCP 多态性 | 第19-20
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· 序列分析 | 第20-21
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· FCGRT 基因启动子频率和基因型频率分析 | 第21
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· 基因位点的Hardy-Weinberg 平衡检验 | 第21
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3 讨论 | 第21-22
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4 小结 | 第22-23
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第三章 FCGRT 启动子不同单倍型荧光素酶报告基因载体构建及其转录活性检测 | 第23-32
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1 材料和方法 | 第23-26
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· 主要试剂 | 第23
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· 主要仪器 | 第23-24
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· 计算机软件及数据库 | 第24
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· 方法 | 第24-26
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· 数据统计分析 | 第26
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2 结果 | 第26-30
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· 目的基因的克隆及测序 | 第26-27
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· FCGRT 基因启动子不同单倍型DNA 片段 | 第27
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· 含FCGRT 基因启动子不同单倍型DNA 片段的重组质粒鉴定 | 第27-28
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· 不同单倍型启动子DNA 片段荧光素酶表达载体测序鉴定 | 第28-29
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· 双荧光素酶报告检测 | 第29-30
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3 讨论 | 第30-31
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4. 小结 | 第31-32
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第四章 中国荷斯坦奶牛 FCGRT 启动子 SNP 对 FcRn m RNA 表达的影响 | 第32-39
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1 材料与方法 | 第32-36
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· 试验动物及采样 | 第32
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· 试剂及仪器 | 第32-33
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· DNA 和RNA 提取 | 第33-34
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· cDNA 的合成 | 第34-35
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· RT-PCR 检测乳腺FcRn 基因mRNA 的表达量 | 第35
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· 数据统计分析 | 第35-36
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2 结果与分析 | 第36-37
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· 奶牛乳腺组织提取DNA 检测 | 第36
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· RT-PCR 内参基因和引物的PCR 检测 | 第36
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· FcRn 基因的扩增曲线及熔解曲线 | 第36-37
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· FCGRT 启动子对FcRn 表达相对定量结果 | 第37
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3. 讨论 | 第37-38
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4. 小结 | 第38-39
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第五章 体外激素处理对乳腺上皮细胞 FcRn m RNA 表达的影响 | 第39-44
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1 材料和方法 | 第39-41
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· 乳腺上皮细胞的培养和富集 | 第39-40
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· 激素处理 | 第40
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· 乳腺上皮细胞RNA 提取和CDNA 的合成 | 第40
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· RT-PCR | 第40-41
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· 数据分析 | 第41
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2 结果与分析 | 第41-42
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· 胰岛素处理乳腺上皮细胞对FcRn mRNA 表达的影响 | 第41
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· 甲状腺素乳腺上皮细胞对FcRn mRNA 表达的影响 | 第41-42
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· 胰高血糖素乳腺上皮细胞对FcRn mRNA 表达的影响 | 第42
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3. 讨论 | 第42-43
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4. 小结 | 第43-44
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总结论 | 第44-45
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参考文献 | 第45-52
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附录 | 第52-57
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致谢 | 第57-58
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攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第58
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