论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 英文缩略词 | 第13-14页 |
| 综述部分 | 第14-28页 |
| 第一章 原始态(Naive state)和始发态(Primed state)胚胎干细胞的研究进展 | 第14-28页 |
| 1 胚胎干细胞(Embryonic Stem Cells,ESCs)研究简史 | 第14-15页 |
| 2 原始态(Naive State)和始发态(Primed State)胚胎干细胞 | 第15-24页 |
| 2.1 小鼠胚胎干细胞(mouse ESCs,mESCs)和人胚胎干细胞(human ESCs,hESCs)的异同 | 第15-17页 |
| 2.1.1 mESCs和hESCs的共同特点 | 第15-16页 |
| 2.1.2 mESCs和hESCs的差异 | 第16-17页 |
| 2.2 多能性干细胞的不同状态：原始态(Naive State)和始发态(Primed State) | 第17-24页 |
| 2.2.1 原始态多能性干细胞 | 第18页 |
| 2.2.2 始发态多能性干细胞 | 第18-20页 |
| 2.2.3 原始态和始发态多能性干细胞之间的转换 | 第20-22页 |
| 2.2.4 影响原始态和始发态多能性干细胞衍生的重要因素 | 第22-24页 |
| 3 2i抑制剂对原始态ESCs的维持 | 第24-26页 |
| 4 牛和水牛ESCs研究进展 | 第26页 |
| 5 研究目的与意义 | 第26-28页 |
| 试验部分 | 第28-73页 |
| 第二章 水牛不同发育阶段胚胎的多能性基因表达模式研究 | 第28-45页 |
| 1 材料和方法 | 第29-36页 |
| 1.1 材料 | 第29-31页 |
| 1.1.1 试验样品及来源 | 第29页 |
| 1.1.2 主要试验试剂及药品 | 第29页 |
| 1.1.3 主要仪器和耗材 | 第29-30页 |
| 1.1.4 主要溶液配制 | 第30-31页 |
| 1.1.5 生物软件 | 第31页 |
| 1.2 试验方法 | 第31-34页 |
| 1.2.1 水牛卵母细胞的体外受精与胚胎培养 | 第31-32页 |
| 1.2.2 水牛囊胚的收集与微量反转录为cDNA | 第32-33页 |
| 1.2.3 qRT-PCR检测基因在mRNA水平的表达情况 | 第33-34页 |
| 1.2.4 胚胎的免疫组织化学 | 第34页 |
| 1.3 试验设计 | 第34-36页 |
| 1.4 统计分析 | 第36页 |
| 2 结果 | 第36-42页 |
| 2.1 水牛不同发育阶段胚胎相关多能性基因表达模式分析 | 第36-38页 |
| 2.2 2i对水牛胚胎发育的影响 | 第38-40页 |
| 2.3 2i对水牛不同发育阶段囊胚多能性的影响 | 第40-42页 |
| 3 讨论 | 第42-44页 |
| 4 结论 | 第44-45页 |
| 第三章 水牛囊胚发育阶段对水牛类ESCs分离培养效果的影响 | 第45-62页 |
| 1 材料与方法 | 第46-53页 |
| 1.1 材料 | 第46-47页 |
| 1.1.1 试验样品与来源 | 第46页 |
| 1.1.2 主要试验试剂及药品 | 第46页 |
| 1.1.3 主要溶液配制 | 第46-47页 |
| 1.2 试验方法 | 第47-53页 |
| 1.2.1 饲养层的制备 | 第47-48页 |
| 1.2.2 水牛类ESCs的分离培养 | 第48-49页 |
| 1.2.3 水牛类ESCs鉴定 | 第49-52页 |
| 1.2.4 试验设计 | 第52-53页 |
| 1.2.5 统计分析 | 第53页 |
| 2 结果分析 | 第53-60页 |
| 2.1 不同发育阶段囊胚及2i对水牛类ESCs初步衍生的影响 | 第53-55页 |
| 2.2 不同发育阶段囊胚源的类ESCs的多能性基因表达模式 | 第55-56页 |
| 2.3 水牛类ESCs的生物特性分析 | 第56-60页 |
| 3 讨论 | 第60-61页 |
| 4 结论 | 第61-62页 |
| 第四章 水牛类ESCs多能性状态的研究 | 第62-73页 |
| 1 材料与方法 | 第63-66页 |
| 1.1 材料 | 第63-64页 |
| 1.1.1 实验样品及来源 | 第63页 |
| 1.1.2 主要试验试剂及药品 | 第63页 |
| 1.1.3 主要试剂配制 | 第63-64页 |
| 1.2 试验方法 | 第64-66页 |
| 1.2.1 H3K27me3检测雌性水牛类ESCs XaXa染色体活性 | 第64-65页 |
| 1.2.2 检测原始态基因(REX-1、KLF4、TBX3)和始发态基因(FGF5、ACTA2)的表达 | 第65-66页 |
| 1.2.3 检测水牛类ESCs对不同多能性信号因子的反应 | 第66页 |
| 2 结果 | 第66-71页 |
| 2.1 雌性水牛类ESCs性染色体活性状态分析 | 第66-67页 |
| 2.2 检测原始态多能性基因REX-1、KLF4、TBX3和始发态多能性基因FGF5的表达 | 第67页 |
| 2.3 检测水牛类ESCs对不同多能性信号的反应 | 第67-71页 |
| 3 讨论 | 第71-72页 |
| 4 结论 | 第72-73页 |
| 全文结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读硕士期间发表学术论文 | 第80页 |
