棉铃虫羧酸酯酶基因克隆及原核表达



棉铃虫羧酸酯酶基因克隆及原核表达

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棉铃虫羧酸酯酶基因克隆及原核表达

论文目录
摘要	第1-9页
ABSTRACT	第9-13页
第一章文献综述	第13-22页
1.1 前言	第13页
1.2 棉铃虫分部与危害	第13-14页
1.3 羧酸酯酶概况	第14-16页
1.3.1 羧酸酯酶分类与命名	第14-15页
1.3.2 羧酸酯酶结构功能机水解机制	第15-16页
1.4 抗药性机理	第16-19页
1.4.1 代谢抗性的分子基础	第17页
1.4.2 羧酸酯酶的抗药性机制	第17-19页
1.5 棉铃虫羧酸酯酶与抗性的研究进展	第19-20页
1.6 研究目的和意义	第20页
1.7 技术路线	第20-22页
第二章材料与方法	第22-28页
2.1 供试材料	第22-23页
2.1.1 供试昆虫	第22页
2.1.2 菌种	第22页
2.1.3 主要试剂	第22页
2.1.4 溶液配制及培养基	第22页
2.1.5 SDS-PAGE电泳试剂	第22-23页
2.1.6 Ni-NTA亲和层析缓冲液配制	第23页
2.1.7 测定蛋白浓度试剂	第23页
2.2 试验方法	第23-28页
2.2.1 羧酸酯酶基因克隆	第23-25页
2.2.2 构建重组表达载体	第25-26页
2.2.3 原核表达	第26页
2.2.4 Ni~2+亲和柱层析	第26-27页
2.2.5 SDS-PAGE检测	第27页
2.2.6 Bradford法测定蛋白浓度	第27-28页
第三章结果与分析	第28-34页
3.1 棉铃虫羧酸脂酶基因克隆和序列比对特征分析	第28-32页
3.2 重组表达载体的构建	第32-33页
3.3 诱导蛋白表达,纯化和检测	第33-34页
3.3.1 纯化蛋白SDS-PAGE检测	第33页
3.3.2 蛋白纯化后的浓度测定	第33-34页
第四章问题与讨论	第34-35页
第五章总结	第35-36页
参考文献	第36-39页
附录	第39-41页
致谢	第41-42页
作者简介	第42页

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