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糖多孢红霉菌表达用质粒pSPU237的构建及其应用
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糖多孢红霉菌表达用质粒pSPU237的构建及其应用
论文目录
 
中文摘要第1-11 页
英文摘要第11-13 页
前言第13-24 页
实验材料第24-30 页
实验方法第30-35 页
　　1.大肠杆菌质粒DNA小量提取第30 页
　　2.链霉菌质粒DNA的提取第30 页
　　3.链霉菌总DNA的提取第30-31 页
　　4.重组质粒的快速鉴定第31 页
　　5.大肠杆菌DH-5α感受态细胞的制备第31 页
　　6.质粒DNA转化大肠杆菌第31 页
　　7.DNA酶切和连接第31-32 页
　　8.DNA电泳和片断回收第32 页
　　9.原生质体的制备、质粒DNA转化第32 页
　　10.电转化第32-33 页
　　11.接合转移实验第33 页
　　12.超声破碎第33-34 页
　　13.CO结合差光谱法测定菌体中的VHB第34 页
　　14.PCR反应第34-35 页
结果与讨论第35-62 页
　　第一部分 糖多孢红霉菌基因转移系统的建立第35-48 页
　　　　1.结合转移系统第35-36 页
　　　　　　· 糖多孢红霉菌的抗药性考察第35-36 页
　　　　　　· 预萌发温度及预萌发时间的考察第36 页
　　　　　　· 固体培养基的考察第36 页
　　　　　　· 质粒的考察第36 页
　　　　2.电激转化系统第36-37 页
　　　　3.原生质体转化第37-47 页
　　　　　　· 质粒的选择第37 页
　　　　　　· PEG介导质粒转化糖多孢红霉菌原生质体的初步尝试第37-38 页
　　　　　　· 糖多孢红霉菌原生质体制备和再生的考察及转化系统的建立第38-47 页
　　　　4.讨论第47-48 页
　　第二部分 表达用质粒pSPU227的构建第48-57 页
　　　　1.质粒pSPU223的构建第48-51 页
　　　　　　· PCR法扩增PmerR启动子第48-49 页
　　　　　　· PmerR基因的克隆和测序第49-50 页
　　　　　　· 质粒pSPU223的构建第50-51 页
　　　　2.质粒pSPU226的构建第51-52 页
　　　　3.质粒pSPU227的构建第52 页
　　　　4.质粒pSPU227酶切验证第52 页
　　　　5.质粒pSPU237的构建第52-55 页
　　　　6.讨论第55-57 页
　　第三部分 质粒pSPU227在糖多孢红霉菌中的应用第57-62 页
　　　　1.质粒pSPU238的构建第57-60 页
　　　　　　· 透明颤菌血红蛋白基因vhb基因的扩增第57-59 页
　　　　　　· 质粒pSPU238的构建第59-60 页
　　　　2.vhb基因的表达及其验证第60-61 页
　　　　3.讨论第61-62 页
结论第62-63 页
参考文献第63-68 页
致谢第68-69 页
附录第69 页

本篇论文共69页，点击这进入下载页面。
 
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