论文目录 | |
1 引言 | 第1-15
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· 马铃薯晚疫病研究进展 | 第6-9
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· 马铃薯晚疫病的发生、传播、危害 | 第6-8
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· 马铃薯晚疫病的防治 | 第8
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· 马铃薯抗晚疫病育种研究 | 第8-9
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· 转基因技术在马铃薯晚疫病抗病育种中的应用 | 第9-11
页 |
· 转基因技术在植物遗传育种中的特点与方法 | 第9-10
页 |
· 转基因技术在马铃薯晚疫病抗病育种中的应用 | 第10-11
页 |
· 农杆菌介导的基因转化机理 | 第11-13
页 |
· T-DNA 转移机理 | 第12-13
页 |
· 农杆菌Ti 质粒载体系统 | 第13
页 |
· 葡萄糖氧化酶基因(GOD 基因)研究进展 | 第13-15
页 |
· 葡萄糖氧化酶及其应用 | 第13-14
页 |
· 葡萄糖氧化酶基因(GOD 基因)的应用 | 第14-15
页 |
· 研究的目的和意义 | 第15
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2 材料与方法 | 第15-32
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· 实验材料 | 第15-16
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· 供试马铃薯品种 | 第16
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· 供试质粒及药剂 | 第16
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· 引物 | 第16
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· 实验使用的主要仪器、设备 | 第16
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· 试验方法 | 第16-32
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· 葡萄糖氧化酶基因植物表达载体的构建 | 第16-22
页 |
· 重组质粒pROKII/GO 转入农杆菌LBA4404 | 第22-25
页 |
· 农杆菌LBA4404 介导将目的基因GO 转入马铃薯 | 第25-32
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3 结果与分析 | 第32-44
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· 葡萄糖氧化酶基因植物表达载体的构建 | 第32-36
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· pMD18-T/GO 转化DH5α感受态细胞 | 第32-33
页 |
· pMD18-T/GO 质粒 HindⅢ酶切、Klenow 补平后再用 BamHI 对其进行酶切,以切取GO 基因 | 第33
页 |
· pROKII 的BamHI/SmaI 双酶切 | 第33-34
页 |
· pROKII/GO 植物表达载体的构建 | 第34-35
页 |
· 重组质粒pROKII/GO 的PCR 检测 | 第35-36
页 |
· 重组质粒pROKII/GO 转化农杆菌LBA4404 | 第36-37
页 |
· 重组质粒pROKII/GO 转入农杆菌LBA4404 感受态细胞 | 第36
页 |
· 转入农杆菌LBA4404 感受态细胞的重组质粒pROKII/GO 的PCR 检测 | 第36-37
页 |
· 采用叶盘法转化马铃薯 | 第37-38
页 |
· 采用茎段侵染法转化马铃薯 | 第38-39
页 |
· 采用叶盘法结合不同培养基配方转化马铃薯 | 第39-41
页 |
· 侵染时间对马铃薯转化的影响 | 第41-42
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· 预培养对马铃薯转化的影响 | 第42-43
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· 愈伤组织的鉴定 | 第43-44
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4 讨论 | 第44-47
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· 使用HindⅢ酶对pMD18-T/GO 质粒进行酶切 | 第44-45
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· PCR 反应中采用LA Taq DNA 聚合酶的效果更明显 | 第45
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· 利用农杆菌介导的方法转化植物的影响因素 | 第45-47
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5 结论 | 第47-48
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致谢 | 第48-49
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参考文献 | 第49-54
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附录 | 第54-56
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作者简介 | 第56
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