紫花苜蓿MsIPI基因克隆及对烟草的遗传转化



紫花苜蓿MsIPI基因克隆及对烟草的遗传转化

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紫花苜蓿MsIPI基因克隆及对烟草的遗传转化

论文目录
摘要	第1-4页
Abstract	第4-9页
1 绪论	第9-15页
· 紫花苜蓿	第9页
· 紫花苜蓿植物学特性	第9页
· 紫花苜蓿生物学特征	第9页
· 紫花苜蓿的经济价值	第9页
· 紫花苜蓿生物技术研究进展	第9-11页
· 组织培养	第10页
· 遗传工程	第10-11页
· 分子标记技术	第11页
· 苜蓿皂苷生物合成研究	第11-13页
· 苜蓿皂苷	第11-12页
· IPP 和DMAPP 的生成	第12-13页
· 碳链的延长和苜蓿皂苷的形成	第13页
· 植物异戊烯基焦磷酸异构酶研究进展	第13-14页
· 本研究的目的、内容和意义	第14-15页
2 紫花苜蓿异戊烯基焦磷酸异构酶基因克隆	第15-32页
· 实验材料、试剂及仪器	第15-16页
· 植物材料、载体和菌株	第15页
· 实验生化试剂	第15-16页
· 实验仪器	第16页
· 实验方法	第16-20页
· 引物设计	第16页
· 紫花苜蓿幼苗的栽植	第16页
· 紫花苜蓿总RNA 的提取	第16-17页
· RNA 反转录cDNA	第17-18页
· PCR 扩增目的片段	第18页
· PCR 目的片段的切胶回收	第18-19页
· 目的片段与克隆载体的连接	第19页
· 连接产物的转化	第19-20页
· 菌体PCR 检测	第20页
· 将序列进行生物信息学分析	第20页
· 实验结果与分析	第20-31页
· 总RNA 提取	第20-21页
· 同源克隆得到紫花苜蓿IPI 基因	第21页
· 菌体PCR 检测结果	第21-22页
· 阳性克隆测序结果	第22页
· 紫花苜蓿MsIPI 基因核酸序列分析	第22-24页
· 紫花苜蓿MsIPI 基因氨基酸序列分析	第24-25页
· 紫花苜蓿MsIPI 基因氨基酸序列同源性比对	第25-27页
· 紫花苜蓿MsIPI 基因氨基酸亲疏水性分析	第27-28页
· 紫花苜蓿MsIPI 基因氨基酸功能位点分析	第28页
· 紫花苜蓿MsIPI 基因氨基酸二级结构分析	第28-29页
· 紫花苜蓿MsIPI 基因系统进化树的分析	第29-31页
· 讨论	第31-32页
3 异戊烯基焦磷酸异构酶基因超表达载体的构建	第32-39页
· 实验材料、试剂及仪器	第32页
· 实验材料	第32页
· 实验试剂	第32页
· 实验仪器	第32页
· 试剂盒	第32页
· 溶液和培养基配制	第32页
· 实验方法	第32-36页
· 引物设计	第32-33页
· 目的基因PCR 扩增引入酶切位点	第33页
· 质粒提取	第33-34页
· 质粒的酶切	第34-35页
· 目的片段的切胶回收纯化	第35页
· 目的片段与表达载体的连接	第35页
· 连接产物的转化	第35-36页
· 转化产物的PCR 检测	第36页
· 实验结果与分析	第36-37页
· 引入酶切位点的目的片段的克隆	第36-37页
· 目的基因克隆载体及表达载体酶切鉴定	第37页
· 讨论	第37-39页
4 农杆菌介导紫花苜蓿MsIPI 基因烟草转化	第39-49页
· 材料、试剂及仪器	第39-40页
· 实验材料	第39页
· 实验试剂	第39-40页
· 实验仪器	第40页
· 实验方法	第40-45页
· 农杆菌感受态的制备	第40-41页
· 农杆菌转化和阳性克隆的鉴定	第41页
· 农杆菌介导的烟草转基因	第41-43页
· 转基因植株的检测	第43-45页
· 结果与分析	第45-49页
· 农杆菌转化检测	第45页
· 转基因植株PCR 检测结果	第45-46页
· 转基因植株RT-PCR 检测结果	第46页
· 转基因植株GUS 基因PCR 检测结果	第46页
· 转基因植株组织化学染色检测结果	第46-47页
· 讨论	第47-49页
5 结论与展望	第49-51页
· 实验结论	第49页
· 创新点	第49页
· 展望	第49-51页
致谢	第51-52页
参考文献	第52-58页
作者简介	第58 页

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