论文目录 | |
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-16页 |
| 1.1 β-胡萝卜素概述 | 第8-10页 |
| 1.1.1 β-胡萝卜素的理化性质 | 第8-9页 |
| 1.1.2 β-胡萝卜素的生理功能 | 第9页 |
| 1.1.3 β-胡萝卜素在食品、化妆中应用 | 第9-10页 |
| 1.2 β-胡萝卜素的来源 | 第10-13页 |
| 1.2.1 化学合成β-胡萝卜素 | 第10页 |
| 1.2.2 天然β-胡萝卜素 | 第10-13页 |
| 1.3 红法夫酵母类胡萝卜素合成相关代谢途径 | 第13-14页 |
| 1.3.1 红法夫酵母简介 | 第13页 |
| 1.3.2 红法夫酵母虾青素代谢途径 | 第13-14页 |
| 1.4 酿酒酵母类胡萝卜素合成相关代谢工程研究 | 第14-15页 |
| 1.4.1 酿酒酵母概况 | 第14-15页 |
| 1.4.2 酿酒酵母代谢工程合成类胡萝卜素的研究现状 | 第15页 |
| 1.5 研究背景及意义 | 第15-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-36页 |
| 2.1 主要仪器和设备 | 第16-17页 |
| 2.2 实验材料、试剂及培养基 | 第17-19页 |
| 2.2.1 实验菌株及载体 | 第17页 |
| 2.2.2 试剂与酶 | 第17-18页 |
| 2.2.3 实验引物 | 第18页 |
| 2.2.4 培养基和提取液 | 第18-19页 |
| 2.3 培养方法 | 第19页 |
| 2.3.1 红法夫酵母的培养 | 第19页 |
| 2.3.2 大肠杆菌培养 | 第19页 |
| 2.4 实验方法 | 第19-36页 |
| 2.4.1 RNAiso Plus提取红法夫酵母总RNA | 第19-20页 |
| 2.4.2 2×CTAB法提取红法夫酵母基因组 | 第20页 |
| 2.4.3 相关引物设计 | 第20页 |
| 2.4.4 q-PCR获得crtE、crtYB、crtI的cDNA序列 | 第20-21页 |
| 2.4.5 以cDNA为模板PCR获得crtE、crtI、crtYB目的基因序列 | 第21-23页 |
| 2.4.6 目的基因表达盒子的构建 | 第23-36页 |
| 第三章 实验结果 | 第36-41页 |
| 3.1 目的基因扩增结果 | 第36-37页 |
| 3.1.1 crtE扩增结果示意图 | 第36页 |
| 3.1.2 crtI扩增结果 | 第36页 |
| 3.1.3 crtYB目的基因扩增结果 | 第36-37页 |
| 3.2 目的基因转化进入p426GPD | 第37-38页 |
| 3.2.1 crtE转化进入p426GPD载体中及双酶切验证 | 第37页 |
| 3.2.2 crtI转化进入p426GPD载体中及双酶切验证 | 第37页 |
| 3.2.3 crtYB转化进入p426GPD载体中及双酶切验证 | 第37-38页 |
| 3.3 目的基因表达盒子的扩增及其结果 | 第38页 |
| 3.4 表达载体的构建 | 第38-41页 |
| 3.4.1 GAP-crtE-CYC1整合入表达载体 | 第38-39页 |
| 3.4.2 GAP-crtYB-CYC1整合进入pRS406-crtE载体载体 | 第39-40页 |
| 3.4.3 GAP-crtI-CYC1克隆进入pRS406-crtE-crtYB载体 | 第40-41页 |
| 结果与讨论 | 第41-42页 |
| 展望 | 第42-43页 |
| 附录 | 第43-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
