论文目录 | |
中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
前言 | 第9-12页 |
材料与方法 | 第12-24页 |
一、材料与方法 | 第12-17页 |
· 工具酶及分子量Marker | 第12页 |
· 主要生化试剂 | 第12页 |
· 培养基、血清及添加剂 | 第12页 |
· 试剂盒 | 第12-13页 |
· 菌株 | 第13页 |
· 质粒 | 第13-14页 |
· 细胞系 | 第14页 |
· 引物 | 第14-16页 |
· 生物信息学分析软件 | 第16-17页 |
· 主要仪器及设备 | 第17页 |
二、实验方法 | 第17-24页 |
· 细胞学实验 | 第17-18页 |
· 细胞系的培养及诱导分化 | 第17页 |
· HL-60细胞的转染 | 第17页 |
· 细胞诱导向粒系或单核-巨噬细胞分化的检测 | 第17-18页 |
· Real-time PCR | 第18-19页 |
· TRIZOI法提取细胞总RNA | 第18页 |
· RNA质量的检测 | 第18页 |
· M-MLV合成cDNA第一链 | 第18-19页 |
· Real-time PCR | 第19页 |
· miRNA real-time PCR | 第19-20页 |
· miRNA的cDNA第一链的合成 | 第19-20页 |
· miRNA的Real-time PCR检测 | 第20页 |
· 基因表达谱分析 | 第20-21页 |
· 基因表达模式相似性分析 | 第20页 |
· 表达模式相似基因的GO及基因功能相关性分析 | 第20-21页 |
· 靶基因预测 | 第21页 |
· 双萤光报告实验 | 第21-24页 |
· 靶基因3'UTR萤光报告载体的构建 | 第21-22页 |
· 质粒DNA的大量制备及纯化 | 第22-23页 |
· 双萤光报告实验 | 第23-24页 |
结果 | 第24-47页 |
· miR-29a和miR-142-3p基因结构 | 第24-25页 |
· HL-60细胞经诱导向髓系分化 | 第25-27页 |
· PMA诱导HL-60细胞向单核细胞分化 | 第25-26页 |
· ATRA诱导HL-60细胞向粒细胞分化 | 第26-27页 |
· HL-60细胞内过表达miR-29a/miR-142-3p | 第27-28页 |
· 过表达miRNAs/髓系诱导的HL-60细胞与对照细胞的mRNA表达芯片分析 | 第28-29页 |
· 实验流程 | 第28页 |
· 数据分析 | 第28-29页 |
· 过表达miR-29a/miR-142-3p及PMA/ATRA诱导分化后基因表达模式分析 | 第29-30页 |
· GO与基因功能相关性分析 | 第30-44页 |
· 对miR-29a/miR-142-3p过表达与PMA/ATRA诱导髓系分化过程中表达模式相似的基因进行聚类分析 | 第30-34页 |
· GO分析和基因功能相关性分析 | 第34-44页 |
· miR-142-3p过表达与ATRA诱导粒系分化过程中表达上调的基因 | 第34-35页 |
· miR-142-3p过表达与PMA诱导单核细胞分化过程中表达上调的基因 | 第35-36页 |
· miR-29a过表达与ATRA诱导粒系分化过程中表达上调的基因 | 第36-37页 |
· miR-29a过表达与PMA诱导单核细胞分化过程中表达上调的基因 | 第37-39页 |
· miR-142-3p过表达与ATRA诱导粒系分化过程中表达下调的基因 | 第39-40页 |
· miR-29a过表达与ATRA诱导粒系分化过程中表达下调的基因 | 第40-42页 |
· miR-29a过表达与PMA诱导单核细胞分化过程中表达下调的基因 | 第42-44页 |
· 靶基因预测与双荧光报告基因验证 | 第44-47页 |
· 靶基因预测 | 第44-46页 |
· 双荧光报告基因验证 | 第46-47页 |
讨论 | 第47-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
文献综述 | 第58-76页 |
参考文献(References) | 第73-76页 |
攻读硕士期间发表和待发表的文章及参加的学术会议 | 第76-77页 |
致谢 | 第77-80页 |