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黄瓜绿斑驳花叶病毒外壳蛋白与寄主烟草蛋白间的互作
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黄瓜绿斑驳花叶病毒外壳蛋白与寄主烟草蛋白间的互作
论文目录
 
摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 前言第11-22页
　　· 黄瓜绿斑驳花叶病毒研究进展第11-14页
　　　　· 黄瓜绿斑驳花叶病毒病的发生及危害第11页
　　　　· CGMMV 的症状第11-12页
　　　　· CGMMV 基因组结构与功能第12-13页
　　　　· CGMMV 的寄主范围和传播途径第13页
　　　　· CGMMV 的防治第13-14页
　　· 酵母双杂交系统及其在植物病毒学中的应用第14-18页
　　　　· 酵母双杂交系统的原理第14-15页
　　　　· 酵母双杂交系统的特点第15-16页
　　　　· 酵母双杂交系统的发展第16-17页
　　　　· 酵母双杂交系统在植物病毒学的应用第17-18页
　　· 双分子荧光互补技术第18-19页
　　· 免疫共沉淀技术第19-20页
　　· 本研究的目的和意义第20-22页
2 CGMMV 外壳蛋白基因的克隆及酵母表达载体的构建第22-31页
　　· 实验材料第22页
　　　　· 供试毒源、菌株、质粒第22页
　　　　· PCR 引物第22页
　　　　· 主要试剂第22页
　　· 实验方法第22-27页
　　　　· 黄瓜病叶总RNA 的提取第22-23页
　　　　· RT-PCR 扩增CGMMV CP第23页
　　　　· CGMMV CP 目的片段的回收第23-24页
　　　　· 目的片段的回收产物与pMD18-T 克隆载体连接第24页
　　　　· 连接产物转化大肠杆菌DH5α第24-25页
　　　　· 重组质粒的鉴定第25-26页
　　　　· pDBLeu 酵母表达载体的改造第26-27页
　　　　· 酵母表达载体的构建第27页
　　· 结果与分析第27-30页
　　　　· CGMMV CP 基因的PCR 扩增第27-28页
　　　　· 重组克隆载体的鉴定第28页
　　　　· 阳性克隆的测序鉴定第28页
　　　　·p DBLeu 酵母表达载体的酶切回收第28-29页
　　　　· 重组酵母表达载体的鉴定第29-30页
　　· 小结与讨论第30-31页
3 利用酵母双杂交技术筛选烟草cDNA 文库第31-42页
　　· 实验材料第31页
　　　　· 菌株、质粒第31页
　　　　· PCR 引物第31页
　　　　· 主要试剂第31页
　　· 实验方法第31-35页
　　　　· MaV203 感受态细胞的制备第31-32页
　　　　· 重组质粒转化酵母菌MaV203第32页
　　　　· 3AT 浓度的测定第32页
　　　　· 含有诱饵质粒pDB-CP 的酵母感受态细胞的制备第32页
　　　　· 烟草cDNA 文库的筛选第32-33页
　　　　· X-Gal 活性检测第33页
　　　　· 阳性克隆酵母质粒的提取第33-34页
　　　　· 阳性克隆中文库质粒插入片段的克隆第34页
　　　　· 阳性克隆的测序及分析第34页
　　　　· 互作蛋白全长酵母表达载体的构建第34-35页
　　· 结果与分析第35-40页
　　　　· 阳性克隆的筛选第35页
　　　　· PCR 鉴定cDNA 插入片段第35-36页
　　　　· 阳性克隆的测序及分析第36页
　　　　· 互作蛋白全长基因的克隆第36-37页
　　　　· 互作蛋白全长基因酵母表达载体的构建第37-38页
　　　　· 互作蛋白全长与CP 的互作验证第38-40页
　　· 小结与讨论第40-42页
4 CGMMV 与烟草蛋白互作的进一步验证第42-54页
　　· 实验材料第42-43页
　　　　· 载体质粒和菌株第42页
　　　　· PCR 引物第42页
　　　　· 主要试剂第42-43页
　　· 实验方法第43-46页
　　　　· CP，RPL14 基因的扩增第43页
　　　　· 扩增产物的电泳检测和回收第43页
　　　　· 表达载体的构建第43-44页
　　　　· 农杆菌EHA105 感受态的制备第44页
　　　　· 重组质粒转化农杆菌EHA105第44页
　　　　· 含有重组质粒的农杆菌EHA105 的鉴定第44页
　　　　· 含有重组质粒的农杆菌注射本氏烟及瞬时表达第44-45页
　　　　· 本氏烟烟草叶片总蛋白的提取及免疫共沉淀分析第45页
　　　　· SDS-PAGE 电泳及Western blot 检测第45-46页
　　· 结果与分析第46-52页
　　　　· 表达载体的构建第46-49页
　　　　· 含有重组质粒的农杆菌EHA105 的鉴定第49-50页
　　　　· 双分子荧光互补技术验证互作第50页
　　　　· 免疫共沉淀验证CP 与RPL14 间的互作第50-51页
　　　　· 互作蛋白的定位第51-52页
　　· 小结与讨论第52-54页
· 全文总结和展望第54-55页
参考文献第55-60页
附录1 载体图谱第60-64页
附录2 所用主要试剂与缓冲液的配制第64-67页
致谢第67页

本篇论文共67页，点击这进入下载页面。
 
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