论文目录 | |
| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略语 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-23页 |
| · 荧光蛋白LOV（Light, Oxygen, Voltage）简介 | 第12-16页 |
| · LOV结构域概况 | 第12-14页 |
| · LOV结构域晶体结构 | 第14-15页 |
| · LOV结构域的应用 | 第15-16页 |
| · 细胞色素b562（cytochrome b562, cytb562） | 第16-17页 |
| · 荧光共振能量转移概况 | 第17-20页 |
| · 荧光共振能量转移原理 | 第17-18页 |
| · 基于FRET机理的荧光分子探针 | 第18-20页 |
| · 胆绿素（biliverdin, BV） | 第20-21页 |
| · G四链体（G-quadruplex）DNA | 第21-23页 |
| 第二章 以LOV2为基础的蛋白酶酶活检测探针 | 第23-46页 |
| · 前言 | 第23-24页 |
| · 实验材料 | 第24-28页 |
| · 菌株和载体 | 第24页 |
| · 培养基配制 | 第24页 |
| · 实验试剂配制 | 第24-28页 |
| · 实验仪器 | 第28页 |
| · 实验方法 | 第28-37页 |
| · 蛋白酶活检测探针的设计 | 第28-29页 |
| · 引物设计和PCR扩增 | 第29-32页 |
| · PCR产物的检测及胶回收 | 第32页 |
| · 重组质粒的构建 | 第32-35页 |
| · 重组质粒在原核生物中表达 | 第35页 |
| · 融合蛋白的亲和纯化及SDS-PAGE | 第35-37页 |
| · 融合蛋白的荧光和紫外可见光吸收光谱的测定 | 第37页 |
| · 结果与分析 | 第37-44页 |
| · PCR产物琼脂糖凝胶电泳检测 | 第37-38页 |
| · 重组质粒的双酶切反应检测 | 第38-39页 |
| · 融合蛋白的SDS-PAGE | 第39-41页 |
| · 融合蛋白的紫外吸收光谱和荧光光谱分析 | 第41-44页 |
| · 小结与结论 | 第44-46页 |
| 第三章 以LOV2为基础的蛋白探针检测Hg~(2+) | 第46-57页 |
| · 前言 | 第46页 |
| · 实验材料 | 第46-47页 |
| · 菌株和载体 | 第46-47页 |
| · 培养基 | 第47页 |
| · 所用试剂 | 第47页 |
| · 实验仪器 | 第47页 |
| · 实验方法 | 第47-50页 |
| · 引物设计与PCR扩增 | 第47-49页 |
| · PCR产物的检测与胶回收 | 第49页 |
| · 重组质粒的构建 | 第49-50页 |
| · 重组质粒在原核生物E.coli中表达 | 第50页 |
| · 融合蛋白的亲和层析纯化及SDS-PAGE | 第50页 |
| · 融合蛋白的荧光和紫外可见光吸收光谱的测定 | 第50页 |
| · 结果与分析 | 第50-55页 |
| · PCR产物琼脂糖凝胶电泳检测 | 第50-51页 |
| · 融合蛋白的SDS-PAGE | 第51-53页 |
| · 突变融合蛋白与Hg~(2+)的荧光光谱 | 第53-55页 |
| · 小结与讨论 | 第55-57页 |
| 第四章 胆绿素与DNA相互作用的研究 | 第57-70页 |
| · 前言 | 第57页 |
| · 实验材料 | 第57-58页 |
| · 所用试剂配制 | 第57-58页 |
| · 实验仪器 | 第58页 |
| · 订购的DNA序列 | 第58页 |
| · 实验方法 | 第58-59页 |
| · 测定DNA与BV在pH= 5.0-9.0 的条件下的紫外吸收光谱 | 第58-59页 |
| · DNA与BV在pH= 5.0、6.0、7.0 的条件下的饱和度吸收光谱 | 第59页 |
| · DNA与BV在pH= 5.0、6.0、7.0 的条件下的化学计量数吸收光谱 | 第59页 |
| · BV对不同结构DNA在pH= 5.0、6.0、7.0 的条件下的选择性吸收光谱 | 第59页 |
| · 结果与分析 | 第59-69页 |
| · DNA与BV在pH= 5.0-9.0 的条件下的紫外吸收光谱 | 第59-61页 |
| · DNA与BV在pH= 5.0、6.0、7.0 的条件下的饱和度曲线 | 第61-63页 |
| · DNA与BV在pH= 5.0、6.0、7.0 的条件下的Job plot曲线 | 第63-66页 |
| · BV对不同结构DNA在pH= 5.0、6.0、7.0 的条件下选择性吸收光谱 | 第66-69页 |
| · 小结与讨论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
