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粗糙脉孢菌ncw1基因功能研究
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粗糙脉孢菌ncw1基因功能研究
论文目录
 
摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
1 前言第10-19页
　　· 纤维素酶第10-11页
　　　　· 纤维素酶的简介第10页
　　　　· 纤维素酶的作用机制第10-11页
　　· 粗糙脉孢菌第11-13页
　　　　· 粗糙脉孢菌简介第11-12页
　　　　· ncw1简介第12-13页
　　· 丝状真菌信号传导途径和表达系统第13-14页
　　　　· 丝状真菌纤维素酶诱导表达过程中的信号传导途径第13-14页
　　　　· 丝状真菌表达系统简介第14页
　　· 里氏木霉第14-17页
　　　　· 里氏木霉的简介第14页
　　　　· 里氏木霉遗传转化研究进展第14-16页
　　　　· RL-P37第16-17页
　　· 研究目的和意义第17-18页
　　· 主要研究内容第18-19页
2 材料与方法第19-42页
　　· 实验仪器和生化试剂第19-22页
　　　　· 实验仪器第19-20页
　　　　· 主要实验试剂第20-22页
　　· 实验用菌株、质粒和引物第22-25页
　　　　· 菌株第22页
　　　　· 质粒第22-23页
　　　　· 引物序列第23-25页
　　· 培养基和缓冲液第25-28页
　　　　· 培养基第25-26页
　　　　· 常用溶液和缓冲液第26-28页
　　· 主要实验方法第28-42页
　　　　· PCR扩增第28页
　　　　· 目的片段的获得第28-29页
　　　　· 质粒DNA抽提第29-30页
　　　　· 酶切和连接第30页
　　　　· 大肠杆菌的转化第30页
　　　　· N.crassa菌株的活化、培养与保藏第30-31页
　　　　· N.crassa分生孢子基因组DNA的提取第31页
　　　　· N.crassa多突变体的构建第31-32页
　　　　· ncw1回补和过表达载体的构建第32-33页
　　　　· N.crassa的电转化第33-34页
　　　　· 蛋白浓度的测定第34页
　　　　· 酶活和还原糖测定第34-36页
　　　　· 发酵液粘度的测定第36页
　　　　· 菌丝干重的测定第36页
　　　　· 丝状真菌RNA提取和纯化第36-37页
　　　　· RT-qPCR第37-38页
　　　　· SDS-PAGE预制胶电泳第38-39页
　　　　· 里氏木霉的培养和基因组提取第39页
　　　　· 里氏木霉原生质体的制备和转化第39-40页
　　　　· Southern杂交第40-42页
3 结果与讨论第42-64页
　　· 粗糙脉孢菌ncw1在纤维素酶表达分泌过程中的分子功能研究第42-58页
　　　　· Δncw1突变体生长实验第42-43页
　　　　· Δncw1突变体摇瓶实验第43-44页
　　　　· Δncw1突变体诱导实验第44-45页
　　　　· Δncw1突变体的回补和过表达第45-51页
　　　　· Δncw1突变体的扫描电镜实验第51页
　　　　· Δncw1突变体的RT-qPCR实验第51-52页
　　　　· Δncw1Δcrel双突变体的构建第52-54页
　　　　· Δncw1Δ3βG四突变体的构建第54-57页
　　　　· 小结第57-58页
　　· 里氏木霉RL-P37尿嘧啶营养缺陷型菌株的构建第58-64页
　　　　· RL-P37 pyr4基因敲除实验设计第58页
　　　　· 敲除盒及回补质粒的构建第58-59页
　　　　· 里氏木霉RL-P37pyr4基因的敲除第59-60页
　　　　· 转化子的初筛第60页
　　　　· Southern杂交验证RL-P37Δpyr4突变体第60-61页
　　　　· RL-P37Δpyr4突变体的回补第61-62页
　　　　· RL-P37Δpyr4突变体产酶分析第62-63页
　　　　· 小结第63-64页
4 结论第64-65页
5 展望第65-66页
6 参考文献第66-72页
7 论文发表情况第72-73页
8 致谢第73页

本篇论文共73页，点击这进入下载页面。
 
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