多基因修饰iPS细胞分化为胰岛素分泌细胞的实验研究 |
论文目录 | | | 摘要 | 第1-8页 | | Abstract | 第8-11页 | | 第—章 绪论 | 第11-16页 | | · 课题来源、研究的目的和意义 | 第11-12页 | | · 国内外研究概况 | 第12-15页 | | · 国外研究概况 | 第12-14页 | | · 国内研究概况 | 第14-15页 | | · 论文的主要研究内容 | 第15-16页 | | 第二章 材料与方法 | 第16-31页 | | · 实验动物及仪器设备 | 第16-19页 | | · 实验动物 | 第16页 | | · 主要仪器 | 第16-17页 | | · 主要试剂 | 第17-19页 | | · 实验流程与方法 | 第19-31页 | | · 含目的基因PDX-1,NeuroD,MafA腺病毒载体的构建及包装 | 第19页 | | · 重组腺病毒滴度测定 | 第19-20页 | | · MEFs的分离培养及饲养细胞的制备 | 第20-21页 | | · MEFs受染重编程为小鼠iPS细胞 | 第21-22页 | | · 碱性磷酸酶染色 | 第22页 | | · 核型分析 | 第22-23页 | | · 拟胚体形成 | 第23页 | | · 畸胎瘤形成实验 | 第23页 | | · RT-PCR | 第23-27页 | | · 细胞免疫荧光 | 第27-28页 | | ·小鼠iPS细胞受染分化为胰岛类P细胞 | 第28页 | | · ELISA | 第28-29页 | | · 细胞移植 | 第29页 | | · 免疫组化检测 | 第29-30页 | | · 统计学处理 | 第30-31页 | | 第三章 结果 | 第31-47页 | | · 获得具有侵袭力的含目的基因的腺病毒 | 第31-32页 | | · 获得具有侵袭力的含目的基因的慢病毒 | 第32-34页 | | · 含目的基因Oct4/Sox2/Klf4/cMyc的慢病毒载体的构建 | 第32-33页 | | · 慢病毒的包装及滴度测定 | 第33-34页 | | · MEFs的获取 | 第34-35页 | | · 小鼠IPS细胞的诱导 | 第35-36页 | | · 小鼠IPS细胞的鉴定 | 第36-40页 | | · 碱性磷酸酶活性检测 | 第36-37页 | | · 干细胞表面标记的免疫染色检测 | 第37页 | | · 干细胞内源基因的表达分析 | 第37-38页 | | · 核型检测 | 第38-39页 | | · 拟胚体形成及三胚层基因的检测 | 第39页 | | · 畸胎瘤形成实验 | 第39-40页 | | · 胰岛素分泌细胞的获取及鉴定 | 第40-47页 | | · Ad-mPDX-1-IRES-GFP、Ad-mNeuroD-IRES-GFP及Ad-mMafA-IRES-GFP转染小鼠iPS细胞 | 第40-41页 | | · 胰岛细胞功能基因的检测 | 第41-43页 | | · 免疫荧光检测胰岛素表达 | 第43页 | | · 体外胰岛素分泌的检测 | 第43-44页 | | · 移植细胞体内作用鉴定 | 第44-47页 | | 第四章 讨论 | 第47-50页 | | 第五章 结论 | 第50-51页 | | 参考文献 | 第51-55页 | | 英文缩写词表 | 第55-58页 | | 综述 | 第58-69页 | | 综述参考文献 | 第63-69页 | | 在攻读硕士学位期间公开发表的论文与参加的项目 | 第69-70页 | | A：在国内外刊物上发表的论文 | 第69页 | | B：所参加的项目 | 第69-70页 | | 致谢 | 第70页 |
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