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鲤春病毒血症病毒G蛋白的原核表达及其单克隆抗体的制备
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鲤春病毒血症病毒G蛋白的原核表达及其单克隆抗体的制备
论文目录
 
摘要第1-4页
Abstract第4-7页
第一章 前言第7-14页
　　1 鲤春病毒血症概况第7-8页
　　　　· 病原第7-8页
　　　　· 流行特点第8页
　　　　· 症状及病理变化第8页
　　2 G 蛋白的研究进展第8-12页
　　　　· 结构与功能第8-9页
　　　　· G 蛋白的体外表达第9-10页
　　　　· G 蛋白在鲤春病毒血症预防上的应用第10-12页
　　　　　　· 用于鲤春病毒检测第10-11页
　　　　　　· 在构建 DNA 疫苗上的应用第11-12页
　　3 单克隆抗体技术在水生生物病毒研究中的应用第12-14页
　　　　· 水生动物病毒的检测方法的建立第12页
　　　　· 在病毒变异分型及生物治疗上的作用第12-13页
　　　　· 在蛋白定位及功能分析上的应用第13页
　　　　· 疫苗研制中的应用第13-14页
第二章 鲤春病毒血症病毒 G 蛋白的克隆、表达及纯化第14-26页
　　· 材料与方法第14-18页
　　　　· 材料第14页
　　　　· 方法第14-18页
　　　　　　· SVCV 的增殖与鉴定第14-15页
　　　　　　· G 基因的生物信息学分析及引物设计第15页
　　　　　　· G 蛋白片段的扩增第15-16页
　　　　　　· 重组表达质粒的构建及表达第16页
　　　　　　· 包涵体的制备第16-17页
　　　　　　· 蛋白透析复性及纯度分析第17页
　　　　　　· Western-Blot第17-18页
　　2 结果第18-23页
　　　　· 鲤春病毒的增殖与鉴定第18页
　　　　· G 蛋白全长 cDNA 序列的克隆及生物信息学分析第18-20页
　　　　· G 蛋白片段的扩增第20页
　　　　· 重组表达质粒的构建第20-21页
　　　　· 重组蛋白的表达及纯化第21-23页
　　3 讨论第23-26页
　　　　· SVCV 增殖与 G 基因的克隆第23页
　　　　· 鲤春病毒 G 蛋白高效表达的影响因素第23-24页
　　　　· 包涵体的处理与复性第24-26页
第三章 抗 SVCV-G 蛋白单克隆抗体的制备第26-34页
　　· 材料与方法第26-31页
　　　　· 材料第26页
　　　　· 方法第26-31页
　　　　　　· 动物免疫第26页
　　　　　　· 筛选方法的建立第26-28页
　　　　　　　　· 间接 ELISA 方法的建立第26-27页
　　　　　　　　· Dot-ELISA 方法的建立第27页
　　　　　　　　· 细胞爬片的间接免疫荧光实验第27-28页
　　　　　　· 细胞融合操作程序第28-30页
　　　　　　　　· 饲养细胞的制备第28页
　　　　　　　　· SP2/0 瘤细胞的制备第28页
　　　　　　　　· 免疫脾细胞的制备第28-29页
　　　　　　　　· 细胞融合第29页
　　　　　　　　· 培养与观察第29-30页
　　　　　　　　· 融合细胞的检测第30页
　　　　　　· 有限稀释法的步骤第30页
　　　　　　· 杂交瘤细胞的冻存第30页
　　　　　　· 杂交瘤细胞的复苏第30-31页
　　2 结果第31-32页
　　　　· 单抗与复性蛋白的间接 ELISA 结果第31页
　　　　· 单抗与复性蛋白的间接 ELISA 结果第31页
　　　　· 单抗与复性蛋白的间接 IFA 结果第31-32页
　　3 讨论第32-34页
　　　　· 免疫程序的制定第32页
　　　　· 影响细胞融合的因素第32页
　　　　· 筛选方法的建立第32-33页
　　　　· 阳性杂交瘤细胞株的冻存及复苏第33-34页
第四章 单克隆抗体的特性分析第34-39页
　　1 材料与方法第34-36页
　　　　· 材料第34页
　　　　· 方法第34-36页
　　　　　　· 抗体的效价第34页
　　　　　　· 抗体亚型分析第34-35页
　　　　　　· 特异性分析第35页
　　　　　　· 稳定性第35-36页
　　2 结果第36-38页
　　　　· 抗体效价测定第36页
　　　　· 抗体类型分析第36-37页
　　　　· 抗体特异性分析第37页
　　　　· 稳定性分析第37-38页
　　3 讨论第38-39页
结语第39-40页
参考文献第40-45页
附录第45-49页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第49-50页
致谢第50 页

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