环氧水解酶的克隆表达和催化性能研究



环氧水解酶的克隆表达和催化性能研究

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环氧水解酶的克隆表达和催化性能研究

论文目录
摘要	第1-6页
Abstract	第6-10页
第1章前言	第10-18页
· 光学活性环氧化物合成的意义	第10-11页
· 光学活性环氧化物的制备	第11-12页
· 环氧水解酶	第12-16页
· 已经克隆表达的EHs	第13-14页
· 底物类型	第14-15页
· 酶的结构与催化机理	第15页
· EHs在有机合成中的应用	第15-16页
· 本课题的意义与研究思路	第16-18页
第2章毛果树环氧水解酶基因的克隆与表达	第18-25页
· 材料与方法	第18-22页
· 主要试剂	第18页
· 主要仪器和分析软件	第18-19页
· 培养基	第19页
· 毛果杨环氧水解酶基因的克隆	第19-21页
· 目的蛋白的诱导表达	第21页
· 环氧化物的酶促水解	第21-22页
· 结果与讨论	第22-24页
· 基因的选取和PCR结果	第22页
· 表达载体的构建	第22-23页
· 重组蛋白的诱导表达	第23-24页
· 环氧化物的酶促水解	第24页
· 本章小结	第24-25页
第3章巨大芽孢杆菌环氧水解酶基因的克隆表达	第25-36页
· 基因克隆策略	第25页
· 材料与方法	第25-30页
· 菌株和培养基	第25-26页
· 巨大芽孢杆菌环氧水解酶的克隆	第26-27页
· 重组酶诱导表达的优化	第27-28页
· 重组酶的纯化	第28页
· 分析方法	第28-30页
· 结果与讨论	第30-35页
· 巨大芽孢杆菌环氧水解酶基因的预测	第30-31页
· 基因组DNA的提取	第31-32页
· PCR扩增	第32页
· 重组质粒的构建	第32-33页
· 重组酶诱导表达的优化	第33-34页
· BMEH的纯化	第34页
· BMEH的亚基数目	第34-35页
· 本章小结	第35-36页
第4章环氧水解酶BMEH底物谱的研究	第36-51页
· 材料与方法	第36-39页
· 主要试剂、仪器和分析软件	第36-37页
· 培养基	第37页
· 外消旋环氧化物的化学合成	第37页
· 重组BMEH的制备	第37-38页
· 分析方法的建立	第38页
· 绝对构型的确定	第38页
· 酶促系列环氧化物水解拆分	第38-39页
· BMEH的同源模建	第39页
· 分子对接研究	第39页
· 结果与讨论	第39-50页
· 消旋环氧化物的合成	第39-40页
· 重组BMEH的制备	第40页
· 标准曲线和手性分析条件	第40-41页
· 底物谱的研究结果	第41-44页
· 区域选择性因子测定	第44-45页
· 同源模建	第45-48页
· 分子对接研究	第48-50页
· 本章小结	第50-51页
第5章 BMEH高效催化制备光学纯环氧化物	第51-54页
· 材料与方法	第51页
· 半制备规模的酶促水解拆分	第51页
· 克级规模生物水解制备(S)-2和(R)-2d	第51页
· 结果与讨论	第51-53页
· 本章小结	第53-54页
全文总结与展望	第54-56页
参考文献	第56-63页
附录	第63-76页
攻读硕士期间撰写的论文和专利	第76-77页
致谢	第77 页

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