论文目录 | |
| 中英文缩写词对照表 | 第1-4页 |
| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 绪论 | 第9-16页 |
| · 微生物来源的磷脂酶C | 第9-12页 |
| · 磷脂酶 C 简介 | 第9页 |
| · 微生物来源磷脂酶 C 的国内外研究进展 | 第9-10页 |
| · 微生物来源磷脂酶 C 应用研究 | 第10-11页 |
| · 单核细胞增生性李斯特菌磷脂酶 C | 第11-12页 |
| · 磷脂酶C酶法脱胶 | 第12-15页 |
| · 磷脂酶 C 酶法脱胶的优点 | 第12-13页 |
| · 磷脂酶 C 酶法脱胶的意义 | 第13页 |
| · 磷脂酶 C 酶法脱胶研究现状 | 第13-15页 |
| · 本课题的立题依据与意义 | 第15页 |
| · 本课题的主要内容与研究思路 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-23页 |
| · 实验材料 | 第16-17页 |
| · 菌株和质粒 | 第16页 |
| · 主要工具酶和试剂 | 第16页 |
| · 培养基 | 第16页 |
| · 仪器设备 | 第16-17页 |
| · 其他原料 | 第17页 |
| · 实验方法 | 第17-23页 |
| · L.monocytogenes 基因组 DNA 的提取 | 第17-18页 |
| · L.monocytogenes 的 lm-plcB 基因克隆 | 第18页 |
| · E.coil (JM109)感受态的制备及转化 | 第18页 |
| · E.coil BL21(DE3)/pET28a-lm-plcB 的构建 | 第18-19页 |
| · E.coil BL21(DE3)/pET28a-lm-plcB 的诱导表达 | 第19页 |
| · E.coil BL21(DE3)/pET28a-lm-plcB 诱导条件的优化 | 第19-20页 |
| · 重组 PLC 的纯化 | 第20-21页 |
| · 重组 PLC 的酶学性质研究 | 第21-22页 |
| · 重组 PLC 的脱胶应用 | 第22-23页 |
| 3 结果与讨论 | 第23-45页 |
| · PLC在大肠杆菌中的克隆表达 | 第23-25页 |
| · lm-plcB 基因的克隆 | 第23页 |
| · 重组表达载体 pET28a-lm-plcB 的构建与鉴定 | 第23-25页 |
| · E.coil BL21(DE3)/pET28a-lm-plcB的诱导表达 | 第25-27页 |
| · 重组 PLC 的 SDS-PAGE 分析 | 第25-26页 |
| · 重组 PLC 的硼砂卵黄固体平板分析 | 第26-27页 |
| · E.coil BL21(DE3)/pET28a-lm-plcB诱导条件的初步优化 | 第27-31页 |
| · 重组 PLC 的酶活力测定 | 第27页 |
| · 诱导接种量的确定 | 第27-28页 |
| · 诱导剂添加时间的确定 | 第28页 |
| · 诱导温度的确定 | 第28-29页 |
| · 诱导剂浓度的确定 | 第29-30页 |
| · 诱导时间的确定 | 第30-31页 |
| · 重组PLC的纯化 | 第31-32页 |
| · 重组PLC酶学性质测定 | 第32-40页 |
| · 最适温度和热稳定性 | 第32-34页 |
| · 最适 pH 和 pH 稳定性 | 第34-35页 |
| · 金属离子对 PLC 活性的影响 | 第35页 |
| · 重组 PLC 的底物特异性研究 | 第35-39页 |
| · 关于 PLC 酶活力测定方法的讨论 | 第39-40页 |
| · 重组PLC的脱胶应用 | 第40-45页 |
| · 重组 PLC 的脱胶 | 第40页 |
| · 重组 PLC 的脱胶工艺优化 | 第40-43页 |
| · PLC 酶法脱胶对大豆毛油精炼得率的影响 | 第43-45页 |
| 主要结论与展望 | 第45-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第52
页 |
