野油菜黄单胞杆菌纤维素酶基因原核表达及其固定化研究



野油菜黄单胞杆菌纤维素酶基因原核表达及其固定化研究

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野油菜黄单胞杆菌纤维素酶基因原核表达及其固定化研究

论文目录
摘要	第1-5页
ABSTRACT	第5-10页
第一章前言	第10-34页
· 生物质新能源的概况	第10-14页
· 能源危机	第10-11页
· 生物质能及燃料乙醇	第11-12页
· 纤维素前处理工艺	第12-13页
· 物理方法	第12页
· 化学方法	第12-13页
· 物理–化学方法	第13页
· 纤维素乙醇生产工艺	第13-14页
· 纤维素酶的研究概况	第14-24页
· 纤维素酶的来源	第14页
· 纤维素酶的组成	第14-15页
· 纤维素酶的作用机制	第15-17页
· 纤维素酶的分子结构	第17-18页
· 纤维素酶的应用	第18-24页
· 食品工业中的应用	第19-20页
· 饲料工业中的应用	第20-21页
· 纺织工业上的应用	第21-22页
· 医药工业中的应用	第22-23页
· 能源和资源开发中的应用	第23-24页
· 蛋白固定化的研究概况	第24-32页
· 固定化酶简介	第24-25页
· 固定化技术研究新进展	第25-28页
· 交联酶聚集体	第25-27页
· 共固定技术	第27-28页
· 定向固定技术	第28-32页
· 非共价的生物介导的固定化方法	第28-30页
· 通过intein 介导的连结	第30页
· 转肽酶sortase 介导的固定化	第30-32页
· 通过RNA 和DNA 展示系统固定化蛋白	第32页
· 本课题的立项背景、目的与意义	第32-34页
· 立项背景	第32-33页
· 研究目的与意义	第33-34页
第二章野油菜黄单胞杆菌Β-1,4-内切纤维素酶的表达纯化、性质测定及其固定化	第34-54页
· 实验材料	第34页
· 试剂和仪器	第34-38页
· 试验方法	第38-54页
· 纤维素酶活性菌株的筛选	第38页
· 菌体基因组DNA 的提取	第38页
· 细菌165 rDNA 扩增与菌种鉴定	第38-39页
· 分析克隆基因序列	第39-40页
· 通过CPEC 方法克隆纤维素酶基因	第40-42页
· 纤维素酶基因的表达与蛋白纯化	第42-47页
· 纤维素酶学性质研究	第47-50页
· 纤维素酶的固定化	第50-52页
· pTWIN 载体GFP 的纯化（几丁质柱）	第52-54页
第三章结果与分析	第54-70页
· 纤维素酶活性菌株的筛选	第54页
· 菌体基因组DNA 的提取	第54-55页
· 细菌165 RDNA 扩增与菌种鉴定	第55页
· 分析克隆基因序列	第55-56页
· CPEC 方法克隆纤维素酶基因	第56-60页
· 纤维素酶基因的克隆	第56-57页
· Nhe I 和BamH I 双酶切原始空质粒pET28a	第57页
· 通用引物引入与酶切后质粒同源臂的片段2	第57-58页
· CPEC 方法，构建pET28a-0639ΔSP	第58页
· 纤维素酶的表达与纯化	第58-59页
· 蛋白浓度测定	第59-60页
· 纤维素酶学性质研究	第60-63页
· 最适pH 与最适反应温度	第60-61页
· pH 耐受性和温度稳定性	第61-62页
· 纤维素酶比活的测定	第62页
· 纤维素酶底物特异性测定	第62页
· 纤维素酶的酶动力学常数测定	第62-63页
· 固定化研究	第63-70页
· 绿色荧光蛋白预实验	第63-67页
· pTWIN-GFP 表达载体构建策略	第63-66页
· 几丁质法纯化GFP	第66-67页
· 固定化绿色荧光蛋白	第67页
· 固定纤维素酶	第67-70页
· 固定化纤维素酶的最适pH 与最适反应温度	第67-68页
· 固定化酶的动力学常数	第68-70页
第四章总结	第70-72页
参考文献	第72-78页
致谢	第78-80页
攻读硕士学位期间已发表或录用的论文	第80-82页

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