论文目录 | |
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-20页 |
| · 分子手性的重要性 | 第9-10页 |
| · 氧化还原酶及其催化不对称反应 | 第10-15页 |
| · 氧化还原酶概述 | 第10-12页 |
| · 短链脱氢/还原酶 | 第12-15页 |
| · 酶蛋白的分子改造 | 第15-18页 |
| · 酶的蛋白质工程 | 第15-17页 |
| · 酶的定点突变理性设计 | 第17-18页 |
| · 本课题研究的内容 | 第18-20页 |
| · 立题意义 | 第18页 |
| · 研究具体内容 | 第18-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-29页 |
| · 实验材料 | 第20-22页 |
| · 菌种 | 第20页 |
| · 培养基 | 第20页 |
| · 实验试剂 | 第20-21页 |
| · 实验仪器 | 第21-22页 |
| · 实验方法 | 第22-29页 |
| · 突变株的构建 | 第22-24页 |
| · 突变基因的克隆 | 第22-24页 |
| · 突变株的构建 | 第24页 |
| · 突变酶的活性表达与纯化 | 第24-26页 |
| · 突变酶的活性表达 | 第24页 |
| · 突变酶的纯化 | 第24-25页 |
| · 突变酶的定性检测 | 第25页 |
| · 突变酶的定量检测 | 第25-26页 |
| · 野生型SCR1 酶赖氨酸的还原性甲基化 | 第26页 |
| · 突变酶酶活的测定 | 第26-27页 |
| · 突变酶对2-羟基苯乙酮和COBE 催化活性的检测 | 第26页 |
| · 突变酶的底物特异性的检测 | 第26-27页 |
| · 突变株的立体选择性的检测 | 第27-29页 |
| · 突变株的全细胞催化转化2-羟基苯乙酮和COBE | 第27页 |
| · 突变株的全细胞催化转化其他潜手性底物 | 第27页 |
| · 手性产物的检测方法 | 第27-29页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第29-47页 |
| · 羰基还原酶辅酶结合域的空间结构分析及其定点突变 | 第29-34页 |
| · 野生型SCR1 酶辅酶结合域空间结构分析 | 第29页 |
| · 野生型SCR1 酶和辅酶结合域突变酶的活性表达与纯化 | 第29-31页 |
| · 辅酶结合域位点突变对酶催化性能的影响 | 第31-34页 |
| · 定点突变对催化活性的影响 | 第31-32页 |
| · 定点突变对酶的底物特异性的影响 | 第32-33页 |
| · 定点突变对立体选择性的影响 | 第33-34页 |
| · 底物结合域定点饱和突变库的构建及其性能评价 | 第34-47页 |
| · 野生型SCR1 酶的甲基化及其核磁共振图谱的检测 | 第34-36页 |
| · 野生型SCR1 酶和辅酶结合域突变酶的活性表达与纯化 | 第36-38页 |
| · 底物结合域K138 位点突变对酶催化性能的影响 | 第38-44页 |
| · K138 饱和突变库对催化活性的影响 | 第38-40页 |
| · K138 突变为极性碱性氨基酸时对底物特异性的影响 | 第40-41页 |
| · K138 突变为极性酸性氨基酸时对底物特异性的影响 | 第41-42页 |
| · K138 突变为极性中性氨基酸时对底物特异性的影响 | 第42-43页 |
| · K138 突变为非极性氨基酸时对底物特异性的影响 | 第43-44页 |
| · 定点饱和突变对立体选择性的影响 | 第44-47页 |
| · K138 饱和突变库立体选择性的考察 | 第44-45页 |
| · K138H/R 不对称催化还原芳香酮 | 第45-47页 |
| 主要结论 | 第47-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第54页 |
