枸杞抗坏血酸过氧化物酶基因LmAPX的克隆及表达分析



枸杞抗坏血酸过氧化物酶基因LmAPX的克隆及表达分析

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枸杞抗坏血酸过氧化物酶基因LmAPX的克隆及表达分析

论文目录
中文摘要	第1-5页
ABSTRACT	第5-10页
第一章文献综述	第10-17页
· 活性氧产生途径及对植物的伤害	第10-11页
· 活性氧的产生途径	第10-11页
· 活性氧对植物的伤害	第11页
· 高等植物中活性氧的清除途径	第11-12页
· 抗坏血酸过氧化物酶的研究进展	第12-14页
· APX分子和酶学特征	第12-13页
· APX基因工程	第13页
· APX抗氧化胁迫机制	第13-14页
· 研究目的意义与技术路线	第14-17页
· 研究意义	第14-15页
· 技术路线	第15-17页
第二章枸杞LmAPX基因的克隆及序列分析	第17-29页
· 实验材料	第17-20页
· 植物材料	第17页
· 菌株及质粒	第17页
· 主要试剂	第17页
· 主要实验仪器	第17-18页
· 试剂配制	第18-19页
· 培养基	第19-20页
· 实验方法	第20-25页
· 枸杞APX基因的克隆	第20-23页
· 大肠杆菌感受态细胞的制备	第23页
· 热激法转化感受态细胞	第23-24页
· PCR产物与pMD18-T载体连接	第24页
· 质粒提取	第24页
· 质粒PCR验证	第24-25页
· 生物信息学分析	第25页
· 结果与分析	第25-28页
· 枸杞叶片总RNA的提取	第25-26页
· LmAPX基因全长序列的克隆	第26页
· LmAPX基因序列分析	第26-28页
· 小结	第28-29页
第三章 LmAPX基因的原核表达	第29-37页
· 实验材料	第29-30页
· 菌株及质粒	第29页
· 主要试剂	第29页
· 主要仪器	第29页
· 培养基	第29页
· 引物设计	第29-30页
· 实验方法	第30-33页
· 原核表达载体的构建	第30-31页
· 原核表达载体pET-28a-LmAPX的转化	第31页
· LmAPX的诱导表达及纯化	第31页
· SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳	第31-32页
· LmAPX蛋白酶学特性分析	第32-33页
· 结果与分析	第33-36页
· 重组载体pET-28a-LmAPX的构建	第33-34页
· 融合蛋白的诱导表达及SDS-PAGE	第34-35页
· LmAPX蛋白酶学特性分析	第35-36页
· 小结	第36-37页
第四章酵母表达载体的构建及转化酵母抗逆性分析	第37-45页
· 实验材料	第37-38页
· 菌株及质粒	第37页
· 主要试剂	第37页
· 主要仪器	第37页
· 培养基	第37-38页
· 实验方法	第38-41页
· 酵母表达载体pYES2-LmAPX的构建及转化大肠杆菌	第38页
· 酿酒酵母感受态细胞的制备	第38-39页
· 重组表达载体的酵母转化及鉴定	第39-40页
· 重组表达载体转化酵母的抗逆性分析	第40-41页
· 结果与分析	第41-44页
· 酵母表达载体pYES2-LmAPX的构建	第41页
· 酵母阳性转化子的鉴定	第41-42页
· 重组表达载体转化酵母的抗逆性分析	第42-44页
· 小结	第44-45页
第五章枸杞LmAPX基因在烟草中的表达分析	第45-61页
· 实验材料	第45-46页
· 菌株和质粒	第45页
· 植物材料	第45页
· 主要仪器	第45页
· 主要试剂	第45页
· 所用培养基	第45-46页
· 实验方法	第46-53页
· 植物表达载体的构建及鉴定	第46页
· 农杆菌转化	第46-47页
· 烟草叶盘法转化及再生	第47-48页
· 转基因烟草的分子检测	第48-51页
· 转基因烟草的耐盐性检测	第51-53页
· 实验结果及分析	第53-60页
· 植物表达载体的构建	第53-54页
· 植物表达载体的农杆菌转化	第54-55页
· 转基因烟草植株的获得	第55页
· 转基因烟草的分子检测	第55-60页
· 小结	第60-61页
第六章讨论、结论与展望	第61-65页
· 讨论	第61-63页
· LmAPX基因的克隆	第61页
· LmAPX在大肠杆菌中的表达分析	第61-62页
· LmAPX在酵母菌中的表达分析	第62页
· LmAPX在植物中的表达分析	第62-63页
· 研究总结	第63-64页
· 展望	第64-65页
参考文献	第65-71页
发表论文和科研情况说明	第71-72页
致谢	第72-73页

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