论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| ABBREVIATIONS | 第9-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-19页 |
| · 甘露聚糖 | 第12-14页 |
| · 木质纤维生物质 | 第12页 |
| · 甘露聚糖分类和来源 | 第12-13页 |
| · 甘露聚糖和甘露寡糖的应用 | 第13-14页 |
| · 甘露聚糖酶的研究 | 第14-18页 |
| · 甘露聚糖的降解酶系 | 第14-15页 |
| · 甘露聚糖酶的分类和结构 | 第15页 |
| · 甘露聚糖酶的来源和性质 | 第15-17页 |
| · 甘露聚糖酶的异源表达和生产 | 第17页 |
| · 甘露聚糖酶的应用 | 第17-18页 |
| · 研究目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 甘露聚糖酶全长基因的克隆研究 | 第19-37页 |
| · 实验材料 | 第19-20页 |
| · 菌种和载体 | 第19页 |
| · 工具酶和生化试剂 | 第19页 |
| · 引物合成和测序 | 第19页 |
| · 实验仪器 | 第19页 |
| · 培养基和常用溶液 | 第19-20页 |
| · 实验方法 | 第20-27页 |
| 2.2.1 Penicillium freii F63 基因组 DNA 的获取 | 第20页 |
| 2.2.2 第 5 家族甘露聚糖酶基因保守区片段的扩增 | 第20-22页 |
| 2.2.3 第 5 家族甘露聚糖酶基因全长序列的获取 | 第22-25页 |
| 2.2.4 第 5 家族甘露聚糖酶全长基因的克隆 | 第25-27页 |
| · 结果与分析 | 第27-36页 |
| 2.3.1 Penicillium freii F63 基因组 DNA 质量分析 | 第27页 |
| 2.3.2 第 5 家族甘露聚糖酶保守区片段的获取 | 第27-28页 |
| 2.3.3 第 5 家族甘露聚糖酶保守区序列的分析 | 第28-29页 |
| 2.3.4 甘露聚糖酶 Man5F63 基因全长序列的获取 | 第29-30页 |
| 2.3.5 甘露聚糖酶基因 man5F63 全长的克隆 | 第30-31页 |
| 2.3.6 甘露聚糖酶基因 man5F63 全长序列分析 | 第31-36页 |
| · 本章小结 | 第36-37页 |
| 第三章 甘露聚糖酶基因 man5F63 在毕赤酵母中的表达研究 | 第37-48页 |
| · 实验材料 | 第37-38页 |
| · 菌种和载体 | 第37页 |
| · 工具酶和生化试剂 | 第37页 |
| · 引物合成 | 第37页 |
| · 实验仪器 | 第37页 |
| · 培养基和常用溶液 | 第37-38页 |
| · 实验方法 | 第38-42页 |
| 3.2.1 真核表达载体 pPIC9-man5F63 的构建 | 第38-40页 |
| 3.2.2 甘露聚糖酶基因 man5F63 在毕赤酵母中表达 | 第40-41页 |
| 3.2.3 阳性重组酵母菌株在摇瓶水平表达重组酶 rMan5F63 | 第41-42页 |
| 3.2.4 重组酶 rMan5F63 的浓缩和脱糖基化 | 第42页 |
| · 结果与分析 | 第42-47页 |
| 3.3.1 真核表达载体 pPIC9-man5F63 构建 | 第42-43页 |
| 3.3.2 真核表达载体 pPIC9-man5F63 转化毕赤酵母感受态细胞 | 第43-44页 |
| 3.3.3 重组酵母菌摇瓶水平表达重组酶 rMan5F63 | 第44-46页 |
| 3.3.4 重组酶 rMan5F63 的浓缩和脱糖基化 | 第46-47页 |
| · 本章小结 | 第47-48页 |
| 第四章 重组酶 rMan5F63 的酶学性质研究 | 第48-56页 |
| · 实验材料 | 第48页 |
| · 菌种和质粒载体 | 第48页 |
| · 工具酶和生化试剂 | 第48页 |
| · 实验仪器 | 第48页 |
| · 常用溶液 | 第48页 |
| · 实验方法 | 第48-50页 |
| 4.2.1 重组酶 rMan5F63 的最适反应 pH 检测 | 第48-49页 |
| 4.2.2 重组酶 rMan5F63 的 pH 稳定性检测 | 第49页 |
| 4.2.3 重组酶 rMan5F63 的最适反应温度检测 | 第49页 |
| 4.2.4 重组酶 rMan5F63 的热稳定性检测 | 第49页 |
| 4.2.5 不同金属离子和化学试剂对重组酶 rMan5F63 的活性影响分析 | 第49页 |
| 4.2.6 重组酶 rMan5F63 的底物特异性和动力学常数检测 | 第49页 |
| 4.2.7 重组酶 rMan5F63 的比活力检测 | 第49-50页 |
| 4.2.8 重组酶 rMan5F63 的产物分析 | 第50页 |
| · 结果与分析 | 第50-54页 |
| 4.3.1 重组酶 rMan5F63 最适 pH 和温度，pH 稳定性与热稳定性测定 | 第50-52页 |
| 4.3.2 不同金属离子和化学试剂对重组酶 rMan5F63 的活性影响测定 | 第52-53页 |
| 4.3.3 重组酶 rMan5F63 的底物特异性、动力学常数和比活力测定 | 第53-54页 |
| 4.3.4 重组酶 rMan5F63 的产物成分测定 | 第54页 |
| · 本章小结 | 第54-56页 |
| 结论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 发表的论文 | 第67
页 |
