论文目录 | |
摘要 | 第1-9
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Abstract | 第9-11
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研究综述 水稻贮藏蛋白的研究进展 | 第11-12
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前言 | 第12-23
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1.水稻胚乳贮藏蛋白的组成 | 第12-13
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· 依据溶解性差异的划分方式 | 第12
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· 依据胚乳贮藏蛋白组分生化特性的划分方式 | 第12-13
页 |
2 水稻种子贮藏蛋白的种类及结构分析 | 第13-19
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· 谷蛋白 | 第13-18
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· 醇溶蛋白 | 第18-19
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· 球蛋白和白蛋白 | 第19
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3 种子贮藏蛋白基因的表达 | 第19-21
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· 谷蛋白基因的表达 | 第20
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· 醇溶蛋白基因的表达 | 第20-21
页 |
· 白蛋白基因的表达 | 第21
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4 水稻种子贮藏蛋白的营养品质 | 第21-23
页 |
第二部分:研究论文 | 第23-62
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摘要 | 第23-24
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Abstract | 第24-25
页 |
前言 | 第25-27
页 |
一、水稻Waxy启动子引导谷蛋白Gt1基因表达载体构建以及超2-10水稻的转化 | 第27-40
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1.材料和方法 | 第27-35
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· 试验材料 | 第27-29
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· 供试水稻品种 | 第27
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· 菌株 | 第27
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· 载体 | 第27-28
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· 主要试剂 | 第28
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· 主要仪器设备 | 第28-29
页 |
· 培养基 | 第29-30
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· 试验方法 | 第30-35
页 |
· Waxy启动子引导Gt1基因表达载体构建 | 第30-31
页 |
· pCAMBIA1301-pWaxy-Gt1重组质粒的鉴定 | 第31-33
页 |
· 水稻成熟胚愈伤组织的诱导及培养(毛万霞) | 第33
页 |
· 根癌农杆菌的培养及其介导的水稻转化(毛万霞) | 第33-35
页 |
结果与分析 | 第35-40
页 |
1.pCAMBIA1301-pWaxy-Gt1-NOS质粒的PCR鉴定 | 第35-36
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2.pCAMBIA1301-pWaxy-Gt1-NOS质粒的酶切鉴定 | 第36
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3.T_0代转基因植株的获得 | 第36-37
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· 根癌农杆菌介导水稻转化 | 第36-37
页 |
· 水稻愈伤组织的诱导 | 第36
页 |
· 水稻愈伤组织的继代培养 | 第36-37
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· 水稻转化后的共培养 | 第37
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· 抗性愈伤组织的筛选 | 第37
页 |
· 抗性愈伤组织的植株再生 | 第37
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4.展望 | 第37-40
页 |
二、转基因水稻的DNA、RNA及蛋白水平检测 | 第40-58
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1.材料和方法 | 第40-50
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· 试验材料 | 第40
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· 主要试剂 | 第40
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· 主要仪器设备 | 第40
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· 实验方法 | 第40-50
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· T_0代转基因水稻植株总DNA的PCR分析 | 第41
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· 转基因植株的PCR分析 | 第41
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· 转基因后代的PCR-Southern blot分析(ECL) | 第41-42
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· 转基因水稻的RT-PCR分析 | 第42-44
页 |
· GUS活性组织化学分析 | 第44
页 |
· 转基因后代的SDS-PAGE分析 | 第44-46
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· 转基因后代的Western bolt分析 | 第46-47
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· 转基因后的In situ Western hybridization分析 | 第47-50
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结果与分析 | 第50-58
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1.T_0代转基因植株的PCR检测 | 第50
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2.T_0转基因植株的PCR-Southern blot检测 | 第50-51
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3.转基因植株的RT-PCR检测 | 第51-53
页 |
· 总RNA的检测 | 第51
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· RT-PCR检测 | 第51-53
页 |
4.T_1代种子GUS检测结果 | 第53-54
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5.T_1代种子的SDS-PAGE检测 | 第54-56
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· T_1代种子糙米SDS-PAGE检测 | 第54-55
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· T_1代种子精米SDS-PAGE检测 | 第55-56
页 |
6.T_1代种子Western检测 | 第56-57
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7.T_1代种子In situ Western hybridization检测 | 第57-58
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讨论和展望 | 第58-62
页 |
1.根癌农杆菌介导法转化水稻方法的改进 | 第58
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2.采用基因工程技术改良水稻营养品质 | 第58-59
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3.启动子的选用 | 第59-62
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参考文献 | 第62-68
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附录:水稻转化相关培养基 | 第68-70
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中英文对照 | 第70-74
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研究生期间论文及研究成果 | 第74-75
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