论文目录 | |
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-34页 |
| 1.1 前言 | 第15页 |
| 1.2 腈转化酶 | 第15-17页 |
| 1.3 酰胺酶 | 第17-20页 |
| 1.3.1 酰胺酶的来源及性质 | 第17-18页 |
| 1.3.2 酰胺酶的分类 | 第18-19页 |
| 1.3.3 酰胺酶酶催化反应的作用机理 | 第19-20页 |
| 1.4 西司他丁的概况 | 第20-25页 |
| 1.4.1 西司他丁简介 | 第20页 |
| 1.4.2 西司他丁的应用 | 第20-21页 |
| 1.4.3 西司他丁的合成方法 | 第21-22页 |
| 1.4.4 S-(+)-2，2-二甲基环丙甲酸(酰胺)的合成 | 第22-25页 |
| 1.4.4.1 不对称合成 S-(+)-2，2-二甲基环丙甲酸 | 第22页 |
| 1.4.4.2 合成2，2-二甲基环丙烷甲酸外消旋体 | 第22-23页 |
| 1.4.4.2.1 2，2-二甲基丙二醇为起始原料 | 第22-23页 |
| 1.4.4.2.2 2，2-二甲氧基环氧乙烷为起始原料 | 第23页 |
| 1.4.4.3 手性拆分制得S-(+)-2，2-二甲基环丙甲酰胺(甲酸) | 第23-25页 |
| 1.4.4.3.1 化学拆分法 | 第23-24页 |
| 1.4.4.3.2 生物拆分法 | 第24-25页 |
| 1.5 微生物育种技术 | 第25-27页 |
| 1.5.1 微生物选育技术的现状及发展 | 第25页 |
| 1.5.1.1 从自然界分离筛选菌株 | 第25页 |
| 1.5.1.2 用物理、化学因子处理诱变菌株 | 第25页 |
| 1.5.2 离子注入育种技术 | 第25-27页 |
| 1.5.2.1 离子束研究进展 | 第25-26页 |
| 1.5.2.2 离子束生物工程学的应用进展 | 第26-27页 |
| 1.6 本课题研究背景、目的及意义 | 第27-28页 |
| 1.7 主要研究内容 | 第28页 |
| 参考文献 | 第28-34页 |
| 第二章 2，2-二甲基环丙甲酰胺 S-酶产生菌的选育及突变株产酶条件研究 | 第34-59页 |
| 2.1 引言 | 第34-35页 |
| 2.2 材料与方法 | 第35-37页 |
| 2.2.1 化学试剂 | 第35页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第35页 |
| 2.2.3 菌种 | 第35-36页 |
| 2.2.4 培养基 | 第36页 |
| 2.2.5 菌体培养 | 第36页 |
| 2.2.6 酰胺酶活力的测定 | 第36页 |
| 2.2.7 分析方法 | 第36页 |
| 2.2.8 离子束辐照装置 | 第36-37页 |
| 2.2.9 离子注入 | 第37页 |
| 2.2.10 低能离子注入工艺与样品处理 | 第37页 |
| 2.2.11 菌种的筛选 | 第37页 |
| 2.2.12 突变株稳定性考察 | 第37页 |
| 2.2.13 突变株产酶条件的优化 | 第37页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第37-55页 |
| 2.3.1 不同剂量与能量对存活率的的影响 | 第38-39页 |
| 2.3.2 诱变菌株的筛选 | 第39-40页 |
| 2.3.3 突变株的稳定性考察 | 第40页 |
| 2.3.4 突变株产酶条件的优化 | 第40-55页 |
| 2.3.4.1 碳源及其用量的对菌株产酶的影响 | 第40-41页 |
| 2.3.4.2 不同氮源对细胞活力的影响 | 第41-42页 |
| 2.3.4.3 不同金属离子对细胞活力的影响 | 第42-43页 |
| 2.3.4.4 不同添加剂对细胞活力的影响 | 第43页 |
| 2.3.4.5 采用Plackett-Burman(PB)设计和旋转中心组和实验设计对其培养基进行优化 | 第43-52页 |
| 2.3.4.5.1 全因子实验设计结果 | 第43-46页 |
| 2.3.5.5.2 响应曲面(RSM)实验设计 | 第46-52页 |
| 2.3.4.6 其它培养条件对菌体生长和产酶的影响 | 第52-55页 |
| 2.3.4.6.1 初始pH对菌体生长和产酶的影响 | 第52页 |
| 2.3.4.6.2 接种量对产酶的影响 | 第52-53页 |
| 2.3.4.6.3 摇瓶装液量对产酶的影响 | 第53-54页 |
| 2.3.4.6.4 培养温度对产酶的影响 | 第54-55页 |
| 2.3.4.7 间歇培养过程中菌体生长及产酶曲线 | 第55页 |
| 2.4 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-59页 |
| 第三章 S-酰胺酶的酶学性质及2，2-二甲基环丙甲酰胺生物催化选择性水解反应研究 | 第59-74页 |
| 3.1 引言 | 第59-60页 |
| 3.2 材料与方法 | 第60-64页 |
| 3.2.1 菌种与培养基 | 第60页 |
| 3.2.2 细胞培养 | 第60页 |
| 3.2.3 静息细胞转化 | 第60-61页 |
| 3.2.4 分析方法 | 第61页 |
| 3.2.5 用手性毛细管气相色谱法测定底物、产物的的浓度时的浓度计算方法以及相关公式 | 第61-64页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第64-72页 |
| 3.3.1 有机共溶剂的选择 | 第64-65页 |
| 3.3.2 温度对酶反应的影响 | 第65-67页 |
| 3.3.3 底物浓度对酶反应的影响 | 第67-68页 |
| 3.3.4 pH值对酶反应的影响 | 第68-70页 |
| 3.3.5 反应动力学 | 第70-71页 |
| 3.3.6 动力学拆分 | 第71-72页 |
| 3.4 结论 | 第72页 |
| 参考文献 | 第72-74页 |
| 第四章 海藻酸钠固定化产S-酰胺酶细胞的研究 | 第74-84页 |
| 4.1 引言 | 第74页 |
| 4.2 材料和方法 | 第74-76页 |
| 4.2.1 固定化材料 | 第74页 |
| 4.2.2 海藻酸钠固定化细胞的制备方法 | 第74-75页 |
| 4.2.3 固定化颗粒菌体量对酶活力的影响 | 第75页 |
| 4.2.4 海藻酸钠浓度对酶活力的影响 | 第75页 |
| 4.2.5 固定剂 CaCl_2浓度对酶活力的影响 | 第75页 |
| 4.2.6 固定时间对酶活力的影响 | 第75页 |
| 4.2.7 最佳转化体系的确定 | 第75页 |
| 4.2.8 固定化细胞反应最适温度 | 第75-76页 |
| 4.2.9 固定化细胞反应最佳底物浓度的确定 | 第76页 |
| 4.2.10 固定化细胞反应批次试验 | 第76页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第76-83页 |
| 4.3.1 固定化菌体量对酶活力的影响 | 第76-77页 |
| 4.3.2 海藻酸钠浓度对酶活力的影响 | 第77页 |
| 4.3.3 固定剂 CaCl_2浓度的确定 | 第77-78页 |
| 4.3.4 固定时间对酶活力影响 | 第78-79页 |
| 4.3.5 最佳转化体系的确定 | 第79-80页 |
| 4.3.6 固定化细胞反应最适温度 | 第80-81页 |
| 4.3.7 固定化细胞反应最佳底物浓度的确定 | 第81-82页 |
| 4.3.8 海藻酸钠固定化细胞最佳转化时间 | 第82页 |
| 4.3.9 固定化细胞反应批次试验 | 第82-83页 |
| 4.4 小结 | 第83页 |
| 参考文献 | 第83-84页 |
| 第五章 壳聚糖固定化产S-酰胺酶细胞的研究 | 第84-93页 |
| 5.1 引言 | 第84页 |
| 5.2 材料和方法 | 第84-86页 |
| 5.2.1 壳聚糖固定化细胞 | 第84页 |
| 5.2.2 固定化颗粒菌体量对酶活力的影响 | 第84-85页 |
| 5.2.3 固定化细胞反应最适pH的确定 | 第85页 |
| 5.2.4 壳聚糖浓度对酶活力的影响 | 第85页 |
| 5.2.5 固定剂三聚磷酸钠浓度对酶活力的影响 | 第85页 |
| 5.2.6 固定时间对酶活力的影响 | 第85页 |
| 5.2.7 固定化细胞反应最佳底物浓度的确定 | 第85页 |
| 5.2.8 固定化细胞反应批次试验 | 第85-86页 |
| 5.3 结果与分析 | 第86-92页 |
| 5.3.1 固定化菌体量对酶活力的影响 | 第86页 |
| 5.3.2 反应最适pH值的确定 | 第86-87页 |
| 5.3.3 壳聚糖浓度对酶活力的影响 | 第87-88页 |
| 5.3.4 固定剂三聚磷酸钠溶液浓度的确定 | 第88页 |
| 5.3.5 固定时间对酶活力的影响 | 第88-89页 |
| 5.3.6 固定化细胞反应最佳底物浓度的确定 | 第89-90页 |
| 5.3.7 壳聚糖电镜剖面图与表面图 | 第90-91页 |
| 5.3.8 固定化细胞反应批次 | 第91-92页 |
| 5.4 结论 | 第92页 |
| 参考文献 | 第92-93页 |
| 第六章 总结与建议 | 第93-95页 |
| 6.1 总结 | 第93-94页 |
| 6.2 建议 | 第94-95页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96页 |
