论文目录 | |
中文摘要 | 第11-12页 |
Abstract | 第12-14页 |
符号说明 | 第14-15页 |
第一章 绪论 | 第15-43页 |
1.1 DNA简介及其检测的意义 | 第15-16页 |
1.2 目前的DNA检测技术 | 第16-26页 |
1.2.1 标记型 | 第16-24页 |
1.2.1.1 荧光分析法 | 第17-18页 |
1.2.1.2 电化学方法 | 第18-20页 |
1.2.1.3 化学发光法 | 第20-21页 |
1.2.1.4 电化学发光法 | 第21-23页 |
1.2.1.5 其他检测方法 | 第23-24页 |
1.2.2 无标记型 | 第24-26页 |
1.3 检测DNA中的放大技术 | 第26-34页 |
1.3.1 核酸体外扩增技术 | 第26-29页 |
1.3.1.1 聚合酶链式反应(PCR) | 第26-27页 |
1.3.1.2 链替代扩增技术(SDA) | 第27页 |
1.3.1.3 连接酶链式反应(LCR) | 第27页 |
1.3.1.4 核酸序列依赖性扩增技术(NASBA) | 第27-28页 |
1.3.1.5 Qβ复制酶技术 | 第28页 |
1.3.1.6 转录介导的扩增(TMA) | 第28-29页 |
1.3.1.7 滚环复制(RCA) | 第29页 |
1.3.2 检测物信号放大技术 | 第29-34页 |
1.3.2.1 基于酶反应的信号放大技术 | 第29-30页 |
1.3.2.2 基于纳米粒子的信号放大技术 | 第30-31页 |
1.3.2.3 基于微磁球的信号放大检测 | 第31-34页 |
1.4 展望 | 第34页 |
1.5 参考文献 | 第34-43页 |
第二章 基于磁球放大技术的电化学发光法检测细胞中mRNA | 第43-59页 |
2.1 前言 | 第43-44页 |
2.2 实验部分 | 第44-49页 |
2.2.1 材料与试剂 | 第44-46页 |
2.2.2 实验仪器 | 第46-47页 |
2.2.3 三联吡啶钌N-羟基琥珀酰亚胺酯的合成 | 第47页 |
2.2.4 荧光检测MBs上的Ru(bpy)_3~(2+)-NHS | 第47-48页 |
2.2.5 链霉亲和素修饰的96孔板包被DNA复合物 | 第48页 |
2.2.6 SA-MBs结合至基底上的B-DNAp,释放并标记上Ru(bpy)_3~(2+)-NHS;用CNTs包被Ru(bpy)_3~(2+)-NHS-MBs | 第48页 |
2.2.7 ECL和ECL光谱检测 | 第48-49页 |
2.2.8 检测细胞中β2M的基因表达 | 第49页 |
2.3 结果与讨论 | 第49-55页 |
2.3.1 ECL光谱法检测人乳腺癌细胞中β2M mRNA含量 | 第49-51页 |
2.3.2 基于CNTs包裹MBs ECL方法检测细胞中β2M的基因表达水平 | 第51-55页 |
2.4 结论 | 第55页 |
2.5 参考文献 | 第55-59页 |
第三章 基于磁球表面DNA杂交-去杂交信号放大荧光检测DNA | 第59-71页 |
3.1 前言 | 第59-61页 |
3.2 实验部分 | 第61-64页 |
3.2.1 材料与试剂 | 第61页 |
3.2.2 实验仪器 | 第61-62页 |
3.2.3 制备DNAp修饰的MBs | 第62页 |
3.2.4 磁球表面B-DNAp和Cy5-DNAd杂交-去杂交反应 | 第62-63页 |
3.2.5 t-DNA与B-DNAc和DNAp-MBs的结合 | 第63页 |
3.2.6 DNAp-MBs的释放及其杂交-去杂交反应 | 第63页 |
3.2.7 Cy5-DNAd-DNAp-MBs落射荧光成像 | 第63-64页 |
3.2.8 定量细胞中RPLP2 mRNA | 第64页 |
3.3 结果与讨论 | 第64-67页 |
3.3.1 磁球表面B-DNAp和Cy5-DNAd杂交-去杂交反应 | 第64-65页 |
3.3.2 定量检测t-DNA | 第65-66页 |
3.3.3 人乳腺癌细胞中RPLP2 mRNA的测定 | 第66-67页 |
3.4 结论 | 第67-68页 |
3.5 参考文献 | 第68-71页 |
第四章 基于多色编码微珠单分子检测多种DNA技术及其应用 | 第71-90页 |
4.1 前言 | 第71-72页 |
4.2 实验部分 | 第72-78页 |
4.2.1 材料与试剂 | 第72-76页 |
4.2.2 实验仪器 | 第76页 |
4.2.3 多色磁球的制备 | 第76-77页 |
4.2.4 编码磁球的荧光成像 | 第77页 |
4.2.5 降解mRNA得到单链cDNAs | 第77-78页 |
4.2.6 多编码MBs定量检测cDNAs | 第78页 |
4.3 结果与讨论 | 第78-86页 |
4.3.1 多色编码微珠单分子检测细胞中多种DNA及其多基因表达 | 第78-86页 |
4.4 结论 | 第86页 |
4.5 参考文献 | 第86-90页 |
致谢 | 第90-91页 |
攻读学位期间发表学术论文 | 第91-92页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第92页 |