烟草NtUGT1基因的克隆及其在芦丁合成中的功能研究
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烟草NtUGT1基因的克隆及其在芦丁合成中的功能研究
论文目录
摘要
第1-8页
ABSTRACT
第8-13页
缩略词
第13-14页
第一章 绪论
第14-31页
· 烟草及其致香物质
第14-15页
· 烟草属植物及其经济价值
第14页
· 烟草致香物质研究进展
第14-15页
· 类黄酮物质合成及调控研究进展
第15-20页
· 类黄酮的种类与分布
第15-16页
· 类黄酮的合成途径及结构基因
第16-19页
· 类黄酮合成途径的调控
第19-20页
· 芦丁研究进展
第20-25页
· 芦丁理化特征
第20-21页
· 芦丁生物学特性研究
第21-22页
· 芦丁生物合成途径
第22-25页
· UDP-糖基转移酶(UGT)研究进展
第25-29页
· 植物糖基转移酶与抗病能力
第26-27页
· 植物糖基转移酶与次生代谢产物合成
第27-28页
· 植物糖基转移酶与内源激素
第28-29页
· 植物糖基转移酶与信号转导
第29页
· 本研究的目的及意义
第29-31页
第二章 烟草NTUGT1基因表达载体构建及烟草遗传转化
第31-47页
· 研究材料
第31-32页
· 植物材料
第31页
· 菌株及载体
第31页
· 酶与生化试剂
第31-32页
· 研究方法
第32-39页
· 烟草总RNA提取
第32页
· 烟草总RNA的质量检测
第32-33页
· cDNA第一链合成
第33页
· NtUGT1基因扩增
第33-35页
· 目的条带的回收
第35页
· PCR产物的TOPO克隆
第35-36页
· 超纯质粒中量提取
第36页
· DNA片段的酶切和连接
第36-37页
· Gateway LR反应
第37页
· 农杆菌感受态细胞的制备及转化
第37-38页
· 常用抗生素贮液及使用浓度
第38-39页
· 结果与分析
第39-46页
· 表达载体构建策略图
第39页
· 中间载体pTOPO-NtUGT1的构建
第39-42页
· 入门克隆pENTR~(TM)2B-NtUGT1的构建
第42-43页
· 通过LR反应得到植物表达载体
第43页
· 烟草遗传转化
第43-44页
· 转NtUGT1基因烟草的获得
第44-46页
· 小节与讨论
第46-47页
第三章 烟草NTUGT1的实时荧光定量PCR分析
第47-55页
· 材料与方法
第47-48页
· 结果与分析
第48-53页
· NtUGT1在转基因烟草叶中的表达情况
第48-49页
· NtCHS在转基因烟草中的表达情况
第49-50页
· NtCHI在转基因烟草中的表达情况
第50页
· NtF3H在转基因烟草中的表达情况
第50-51页
· NtFLS在转基因烟草中的表达情况
第51-52页
· NtDFR1在转基因烟草中的表达情况
第52页
· NtANS1在转基因烟草中的表达情况
第52-53页
· 小结与讨论
第53-55页
第四章 转基因烟草类黄酮物质含量分析
第55-69页
· 材料和方法
第55-56页
· 试剂
第55页
· 植物材料
第55页
· 分离纯化
第55页
· 色谱和质谱法
第55-56页
· 结果与分析
第56-68页
· 转基因烟草叶片中类黄酮物质含量
第56-60页
· 转基因烟草花中类黄酮物质的测定
第60-68页
· 小节与讨论
第68-69页
第五章 总结和展望
第69-71页
致谢
第71-72页
参考文献
第72-81页
附录A 攻读硕士期间发表论文
第81-82页
附录B 烟草糖基转移酶NTUGT1的基因序列与氨基酸序列
第82-83页
本篇论文共
83
页,
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