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A型流感病毒蛋白与宿主蛋白相互作用研究

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A型流感病毒蛋白与宿主蛋白相互作用研究
论文目录
 
摘要第1-4页
ABSTRACT第4-6页
目录第6-9页
第一章 文献综述第9-23页
  · 流感病毒综述第9-17页
    · 流感病毒概述第9页
    · 流感病毒的复制第9-10页
    · 流感病毒的进化方式第10-11页
    · 流感病毒常用的检测方法第11-13页
    · 流感病毒的结构第13-14页
    · 非结构蛋白 NS1第14-17页
  · HSP70 蛋白第17-20页
    · HSP70 的结构及其基因定位第18-19页
    · HSP70 的生物学功能第19-20页
  · 蛋白质相互作用的研究方法第20-22页
    · 酵母双杂交第20页
    · GST Pull Down第20-21页
    · 免疫荧光共定位第21页
    · 免疫共沉淀第21-22页
  · 研究的目的和意义第22-23页
第二章 流感病毒 NS1 蛋白多抗的制备第23-33页
  · 实验材料第23-25页
    · 载体及菌株第23页
    · 主要试剂第23-25页
  · 试验方法第25-28页
    · pET-NS1 载体的构建第25页
    · 凝胶回收 PCR 产物第25页
    · pET28 和目的片段双酶切第25-26页
    · 柱式回收酶切产物第26页
    · 构建连接体系第26页
    · 连接产物转化到大肠杆菌 Trans5第26页
    · 阳性菌质粒提取第26-27页
    · 双酶切验证重组质粒第27页
    · 将重组质粒转化到大肠杆菌 BL21(DE3)第27页
    · 重组质粒的诱导表达第27页
    · 纯化目的蛋白第27页
    · 用抗原免疫小鼠第27-28页
    · ELISA 检测抗体滴度第28页
  · 试验结果第28-31页
    · pET-NS1 载体的构建第28-29页
    · 重组菌的诱导表达及纯化第29-30页
    · ELISA 检测多抗的效价第30-31页
  · 讨论第31-32页
    · pET-NS1 重组蛋白的表达及纯化第31页
    · 多抗的制备第31-32页
  · 小结第32-33页
第三章 流感病毒 NS1 蛋白与 HSP70 相互作用的研究第33-48页
  · 细胞和载体第33页
  · 主要试剂第33-35页
  · 试验方法第35-40页
    · 构建 TAP-NS1 载体第35页
    · 提取转染用质粒第35页
    · TAP-NS1 质粒转染 HEK 细胞第35-36页
    · Western Blot 检测 TAP-NS1 蛋白的表达第36页
    · G418 筛选 HEK 细胞稳定表达 NS1 蛋白细胞株第36页
    · 纯化 NS1 重组蛋白第36-38页
    · 双向电泳第38页
    · 质谱分析第38-39页
    · GST Pull Down第39-40页
    · 免疫荧光共定位第40页
  · 试验结果第40-45页
    · TAP-NS1 载体的构建第40-41页
    · 真核表达载体 TAP-NS1 转染 HEK 细胞及 G418 筛选结果第41页
    · G418 筛选 HEK 细胞稳定表达 NS1 蛋白细胞株第41-42页
    · TAP-NS1 蛋白纯化第42页
    · 双向电泳结果第42-43页
    · GST Pull Down 试验结果第43-44页
    · 免疫荧光共定位第44-45页
  · 讨论第45-47页
    · 双向电泳试验结果第45-46页
    · NS1 蛋白与 HSP70 蛋白的相互作用第46-47页
  · 小结第47-48页
第四章 结论第48-49页
参考文献第49-55页
附录一:主要化学试剂第55-56页
附录二:主要仪器第56-57页
发表论文和参加科研情况说明第57-58页
致谢第58页

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