论文目录 | |
摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-20页 |
1 核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de bary)及其生物防治研究进展 | 第11页 |
· 核盘菌的寄主范围及危害 | 第11页 |
· 核盘菌的生物防治 | 第11页 |
2 菌寄生菌及其作用机制的研究进展 | 第11-14页 |
· 菌寄生菌 | 第11-12页 |
· 菌寄生菌作用机制的研究 | 第12-14页 |
3 常用差异基因筛选方法 | 第14-18页 |
· 表达序列标签(Expressed Sequence Tag,EST)技术 | 第14-15页 |
· mRNA 差异显示(m RNA Differential Display,DD)技术 | 第15-16页 |
· 代表性差异分析法(Representational difference analysis,RDA) | 第16页 |
· DNA 微阵列技术(DNA microarray) | 第16-17页 |
· 抑制消减杂交技术(Suppression Subtractive Hybridization,SSH) | 第17-18页 |
4 本研究的目的及意义 | 第18-20页 |
第二章 粘帚霉菌寄生核盘菌菌核的能力及其代谢产物分析 | 第20-30页 |
1 材料与方法 | 第20-24页 |
· 材料 | 第20-21页 |
· 方法 | 第21-24页 |
· 菌核的制备 | 第21页 |
· 菌株活化 | 第21页 |
· 不同粘帚霉菌株对核盘菌菌核寄生能力的测定 | 第21-22页 |
· 粘帚霉菌株寄生大豆核盘菌菌核代谢产物分析 | 第22-23页 |
· 不同粘帚霉菌株对核盘菌菌核的寄生能力与细胞壁降解酶活性的相关性分析 | 第23页 |
· 粘帚霉HL-1-1 对核盘菌菌核的降解能力与细胞壁降解酶活性的相关性分析 | 第23-24页 |
2 结果与分析 | 第24-28页 |
· 粘帚霉对核盘菌菌核寄生能力的比较与分析 | 第24页 |
· 粘帚霉寄生大豆核盘菌菌核代谢产物分析 | 第24-26页 |
· 代谢产物抑菌活性的测定 | 第24-25页 |
· 代谢产物细胞壁降解酶的活性 | 第25-26页 |
· 不同粘帚霉菌株寄生能力、代谢产物抑菌活性、代谢产物中几丁质酶及葡聚糖酶活性之间的相关分析 | 第26-27页 |
· 培养时间对粘帚霉HL-1-1 代谢产物中细胞壁降解酶活性的影响 | 第27-28页 |
· 葡聚糖酶和几丁质酶活性的检测 | 第27-28页 |
· 粘帚霉HL-1-1 对核盘菌菌核的降解程度与细胞壁降解酶活性的相关性分析 | 第28页 |
3 本章小结 | 第28-30页 |
第三章 应用SSH 技术构建粘帚霉HL-1-1 寄生核盘菌菌核前后CDNA 消减文库 | 第30-46页 |
1 材料与方法 | 第30-42页 |
· 材料 | 第30-31页 |
· 方法 | 第31-42页 |
· 实验器皿处理 | 第31-32页 |
· 菌株的培养 | 第32页 |
· 总RNA 的提取 | 第32页 |
· 总RNA 产量和质量的检测 | 第32-33页 |
· mRNA 纯化 | 第33页 |
· 乙醇法浓缩mRNA | 第33页 |
· 应用SSH 技术分离差异表达基因片断 | 第33-40页 |
· 差异表达序列片段的回收 | 第40-41页 |
· 差异表达序列片段的克隆 | 第41页 |
· PCR 法鉴定重组质粒 | 第41页 |
· 差异表达序列片段的测序及同源性分析 | 第41-42页 |
2 结果与分析 | 第42-46页 |
· 总RNA 及mRNA 的检测 | 第42页 |
· 消化效率检测 | 第42-43页 |
· 连接效率分析 | 第43页 |
· 抑制性PCR 分析消减杂交效率 | 第43-44页 |
· PCR 法初步筛选重组质粒 | 第44页 |
· 差异表达片断的序列测定及其同源性分析 | 第44-46页 |
第四章 反式NORTHERN 杂交检测CDNA 消减文库有效性 | 第46-50页 |
1 材料与方法 | 第46-48页 |
· 材料 | 第46-47页 |
· 方法 | 第47-48页 |
· 探针的制备 | 第47页 |
· 预杂交 | 第47页 |
· 杂交 | 第47-48页 |
· 洗膜 | 第48页 |
· 免疫检测 | 第48页 |
2 结果与分析 | 第48-50页 |
第五章 讨论 | 第50-52页 |
1 关于细胞壁降解酶类 | 第50-51页 |
2 关于粘帚霉寄生核盘菌菌核CDNA 消减文库 | 第51-52页 |
结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-60页 |
附录 | 第60-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
作者简历 | 第65页 |