论文目录 | |
摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-14页 |
文献综述 | 第14-25页 |
第一章 脂联素概述 | 第14-18页 |
1.1 脂联素的发现 | 第14-15页 |
1.2 脂联素的分泌和功能 | 第15-18页 |
第二章 细胞凋亡研究进展 | 第18-23页 |
2.1 细胞凋亡概述 | 第18-20页 |
2.2 细胞凋亡的线粒体途径 | 第20页 |
2.3 细胞凋亡的调控 | 第20-23页 |
第三章 脂联素与脂肪细胞凋亡研究进展 | 第23-25页 |
3.1 脂肪细胞凋亡 | 第23-24页 |
3.2 脂联素与细胞凋亡 | 第24-25页 |
试验研究 | 第25-57页 |
前言 | 第25-26页 |
第四章 脂联素调节 3T3-L1脂肪细胞凋亡 | 第26-38页 |
4.1 材料 | 第26-27页 |
4.1.1 细胞 | 第26页 |
4.1.2 主要试剂 | 第26-27页 |
4.1.3 设备仪器 | 第27页 |
4.2 方法 | 第27-32页 |
4.2.1 质粒载体提取 | 第27页 |
4.2.2 细胞培养 | 第27-28页 |
4.2.3 质粒载体转染 | 第28页 |
4.2.4 反转录及实时定量PCR | 第28-29页 |
4.2.5 细胞总RNA提取 | 第29页 |
4.2.6 Hoechst33258染色 | 第29页 |
4.2.7 Annexin V-FITC/PI染色 | 第29-30页 |
4.2.8 细胞总蛋白提取 | 第30页 |
4.2.9 Western Blot检测 | 第30-32页 |
4.2.10 数据统计及分析 | 第32页 |
4.3 结果与分析 | 第32-36页 |
4.3.1 脂联素超表达及干扰效率检测 | 第32页 |
4.3.2 棕榈酸诱导细胞凋亡模型构建 | 第32-33页 |
4.3.3 3T3-L1脂肪细胞凋亡形态学观察 | 第33-34页 |
4.3.4 脂联素对 3T3-L1脂肪细胞凋亡因子表达的影响 | 第34-35页 |
4.3.5 脂联素调节 3T3-L1脂肪细胞凋亡形态观察 | 第35页 |
4.3.6 脂联素调节 3T3-L1脂肪细胞凋亡 | 第35-36页 |
4.4 讨论 | 第36-37页 |
4.5 小结 | 第37-38页 |
第五章 脂联素调节线粒体途径脂肪细胞凋亡 | 第38-45页 |
5.1 材料 | 第38-39页 |
5.1.1 细胞 | 第38页 |
5.1.2 主要试剂 | 第38页 |
5.1.3 仪器设备 | 第38-39页 |
5.2 方法 | 第39页 |
5.2.1 质粒载体提取 | 第39页 |
5.2.2 细胞培养 | 第39页 |
5.2.3 细胞转染 | 第39页 |
5.2.4 JC-1 染色及流式检测 | 第39页 |
5.2.5 细胞总RNA提取 | 第39页 |
5.2.6 反转录及实时定量PCR | 第39页 |
5.2.7 细胞总蛋白提取 | 第39页 |
5.2.8 Western Blot检测 | 第39页 |
5.2.9 数据统计及分析 | 第39页 |
5.3 结果与分析 | 第39-42页 |
5.3.1 脂联素对 3T3-L1脂肪细胞线粒体膜电位的影响 | 第39-40页 |
5.3.2 脂联素对 3T3-L1脂肪细胞Cyt c表达的影响 | 第40-41页 |
5.3.3 脂联素对 3T3-L1脂肪细胞凋亡相关基因表达的影响 | 第41-42页 |
5.3.4 脂联素调控线粒体途径凋亡的相关信号通路 | 第42页 |
5.4 讨论 | 第42-44页 |
5.5 小结 | 第44-45页 |
第六章 脂联素调节周期阻滞诱发的脂肪细胞凋亡 | 第45-51页 |
6.1 材料 | 第45-46页 |
6.1.1 细胞 | 第45页 |
6.1.2 主要试剂 | 第45页 |
6.1.3 仪器设备 | 第45-46页 |
6.2 方法 | 第46页 |
6.2.1 质粒载体提取 | 第46页 |
6.2.2 细胞培养 | 第46页 |
6.2.3 细胞转染 | 第46页 |
6.2.4 细胞周期流式细胞术分析 | 第46页 |
6.2.5 细胞总RNA提取 | 第46页 |
6.2.6 反转录及实时定量PCR | 第46页 |
6.2.7 细胞总蛋白提取 | 第46页 |
6.2.8 Western Blot检测 | 第46页 |
6.2.9 数据统计及分析 | 第46页 |
6.3 结果与分析 | 第46-48页 |
6.3.1 3T3-L1脂肪细胞周期阻滞凋亡模型构建 | 第46-47页 |
6.3.2 脂联素对 3T3-L1脂肪细胞周期的影响 | 第47-48页 |
6.3.3 脂联素对 3T3-L1脂肪细胞周期相关基因的影响 | 第48页 |
6.4 讨论 | 第48-50页 |
6.5 小结 | 第50-51页 |
第七章 脂联素调节内质网应激诱发的脂肪细胞凋亡 | 第51-56页 |
7.1 材料 | 第51页 |
7.1.1 细胞 | 第51页 |
7.1.2 主要试剂 | 第51页 |
7.1.3 仪器设备 | 第51页 |
7.2 方法 | 第51-52页 |
7.2.1 质粒载体提取 | 第51-52页 |
7.2.2 细胞培养 | 第52页 |
7.2.3 细胞转染 | 第52页 |
7.2.4 细胞总RNA提取 | 第52页 |
7.2.5 反转录及实时定量PCR | 第52页 |
7.2.6 细胞总蛋白提取 | 第52页 |
7.2.7 Western Blot检测 | 第52页 |
7.2.8 数据统计及分析 | 第52页 |
7.3 结果与分析 | 第52-54页 |
7.3.13T3-L1脂肪细胞内质网应激凋亡模型构建 | 第52-53页 |
7.3.2 脂联素对 3T3-L1脂肪细胞内质网应激相关基因的影响 | 第53页 |
7.3.3 脂联素调控内质网应激的相关信号通路 | 第53-54页 |
7.4 讨论 | 第54-55页 |
7.5 小结 | 第55-56页 |
第八章 结论、创新点以及进一步研究内容 | 第56-57页 |
8.1 结论 | 第56页 |
8.2 创新点 | 第56页 |
8.3 进一步研究内容 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-61页 |
附录 | 第61-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
作者简介 | 第66页 |