论文目录 | |
| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 縮略词表 | 第12-13页 |
| 1. 前言 | 第13-15页 |
| 2. 材料与方法 | 第15-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第15-27页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第15页 |
| 2.1.2 主要药品及试剂来源 | 第15-16页 |
| 2.1.3 主要实验仪器及设备 | 第16-17页 |
| 2.1.4 主要试剂的配制及贮存 | 第17-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-36页 |
| 2.2.1 小鼠睾丸组织曲细精管体外培养模型的建立 | 第27页 |
| 2.2.2 HE染色法检测培养的曲细精管的形态结构 | 第27页 |
| 2.2.3 幼鼠睾丸组织支持细胞的分离 | 第27-28页 |
| 2.2.4 小鼠睾丸组织生精细胞的分离 | 第28-29页 |
| 2.2.5 幼鼠睾丸组织支持细胞的免疫双荧光法鉴定 | 第29页 |
| 2.2.6 Western blotting | 第29-32页 |
| 2.2.7 吖啶橙(AO)染色观察细胞形态及胞质内酸性膜泡 | 第32-33页 |
| 2.2.8 透射电镜法观察自噬体的形成 | 第33-34页 |
| 2.2.9 免疫荧光分析 | 第34-36页 |
| 3. 实验结果 | 第36-58页 |
| 3.1 小鼠睾丸组织曲细精管体外培养模型的建立 | 第36页 |
| 3.2 无血清(饥饿)体外培养对小鼠曲细精管中自噬相关蛋白Hsp90、Hsp70、LC3表达的影响 | 第36-38页 |
| 3.3 无血清(饥饿)体外培养对小鼠曲细精管中自噬泡形成的影响 | 第38-40页 |
| 3.4 缺氧(氮气培养法)体外培养对小鼠曲细精管中自噬相关蛋白Hsp90、Hsp70、LC3表达的影响 | 第40-41页 |
| 3.5 缺氧和自噬抑制剂3-MA(5mmol/L)对小鼠曲细精管中自噬相关蛋白Hsp90、Hsp70、LC3表达的影响 | 第41-43页 |
| 3.6 氧化应激对小鼠曲细精管中自噬相关蛋白Hsp90、Hsp70、LC3表达的影响 | 第43页 |
| 3.7 培养温度对小鼠曲细精管中自噬相关蛋白Hsp90、Hsp70、LC3表达的影响 | 第43-44页 |
| 3.8 体外培养的小鼠支持细胞自噬的诱因和特点 | 第44-49页 |
| 3.8.1 无血清(饥饿)体外培养对支持细胞内自噬相关蛋白LC3表达的影响 | 第44-45页 |
| 3.8.2 缺氧(氮气培养法)体外培养对支持细胞内自噬相关蛋白LC3表达的影响 | 第45页 |
| 3.8.3 热激对支持细胞内自噬相关蛋白LC3表达的影响 | 第45-46页 |
| 3.8.4 吖啶橙(AO)染色观察支持细胞形态及胞质内酸性膜泡 | 第46-47页 |
| 3.8.5 透射电镜法观察支持细胞内自噬体的生成情况 | 第47-49页 |
| 3.9 体外培养的小鼠生精细胞自噬的诱因和特点 | 第49-53页 |
| 3.9.1 无血清(饥饿)体外培养对生精细胞内自噬相关蛋白LC3表达的影响 | 第49页 |
| 3.9.2 缺氧(氮气培养法)体外培养对生精细胞内自噬相关蛋白LC3表达的影响 | 第49-50页 |
| 3.9.3 热激对生精细胞内自噬相关蛋白LC3表达的影响 | 第50页 |
| 3.9.4 吖啶橙(AO)染色观察生精细胞形态及胞质内酸性膜泡 | 第50-51页 |
| 3.9.5 透射电镜法观察生精细胞内自噬体的生成情况 | 第51-53页 |
| 3.10 支持细胞CMA途径中自噬相关蛋白LAMP-2表达量的变化 | 第53-56页 |
| 3.10.1 无血清(饥饿)体外培养下支持细胞CMA途径中自噬相关蛋白LAMP-2表达量的变化 | 第54页 |
| 3.10.2 缺氧(氮气培养法)体外培养下支持细胞CMA途径中自噬相关蛋白LAMP-2表达量的变化 | 第54页 |
| 3.10.3 热激下支持细胞CMA途径中自噬相关蛋白LAMP-2表达量的变化 | 第54-55页 |
| 3.10.4 无血清(饥饿)体外培养下支持细胞CMA途径中自噬相关蛋白LAMP-2的免疫荧光分析 | 第55-56页 |
| 3.11 生精细胞CMA途径中自噬相关蛋白LAMP-2表达量的变化 | 第56-58页 |
| 3.11.1 无血清(饥饿)体外培养下生精细胞CMA途径中自噬相关蛋白LAMP-2表达量的变化 | 第56-57页 |
| 3.11.2 缺氧(氮气培养法)体外培养下生精细胞CMA途径中自噬相关蛋白LAMP-2表达量的变化 | 第57页 |
| 3.11.3 热激下生精细胞CMA途径中自噬相关蛋白LAMP-2表达量的变化 | 第57-58页 |
| 4. 讨论 | 第58-64页 |
| 4.1 小鼠睾丸组织曲细精管体外培养模型的建立 | 第58页 |
| 4.2 小鼠支持细胞和生精细胞中存在基本的自噬过程 | 第58-59页 |
| 4.3 小鼠睾丸组织曲细精管内的自噬可在营养缺乏时被激活 | 第59-60页 |
| 4.4 缺氧可在一定程度上增加小鼠睾九组织曲细精管内的自噬水平 | 第60页 |
| 4.5 适度高温可增加小鼠睾丸组织曲细精管内的自噬水平 | 第60-61页 |
| 4.6 体外培养的支持细胞自噬特征的初步研究 | 第61-62页 |
| 4.7 体外培养的生精细胞自噬特征的初步研究 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-67页 |
| 综述：细胞自噬研究进展 | 第67-93页 |
| 一. 自噬与细胞存活 | 第67页 |
| 二. 自噬类型及机制 | 第67-68页 |
| 三. 自噬在营养缺乏时被激活 | 第68-69页 |
| 四. 自噬基因 | 第69-70页 |
| 五. 自噬过程中内体和溶酶体的融合事件 | 第70-72页 |
| 六. 自噬的作用 | 第72-73页 |
| 七. 自噬体的检测 | 第73-74页 |
| 八. 分子伴侣介导的自噬(CMA) | 第74-83页 |
| 8.1 LAMP蛋白与自噬体和吞噬小体的成熟 | 第74-76页 |
| 8.2 分子伴侣介导的自噬(CMA)的分子机制 | 第76-78页 |
| 8.3 分子伴侣介导的自噬(CMA)的生理功能 | 第78-79页 |
| 8.4 CMA与衰老 | 第79-80页 |
| 8.5 CMA与疾病 | 第80-83页 |
| 8.5.1 CMA与溶酶体贮积症 | 第80-81页 |
| 8.5.2 CMA与肾病 | 第81页 |
| 8.5.3 CMA与神经退行性疾病 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-93页 |
| 致谢 | 第93-95页 |
| 附件 | 第95页 |
