论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1.1 前言 | 第13页 |
| 1.2 金属硫蛋白的研究进展 | 第13-19页 |
| 1.2.1 金属硫蛋白的结构特征及理化特性 | 第13-15页 |
| 1.2.2 金属硫蛋白的分类及分布 | 第15-16页 |
| 1.2.3 金属硫蛋白的合成 | 第16页 |
| 1.2.4 金属硫蛋白的生物学功能 | 第16-18页 |
| 1.2.5 金属硫蛋白的应用 | 第18-19页 |
| 1.3 内质网应激相关蛋白的研究概况 | 第19-23页 |
| 1.3.1 内质网应激简介 | 第19-20页 |
| 1.3.2 内质网应激激活的信号通路 | 第20-21页 |
| 1.3.3 内质网应激产生的效应 | 第21-22页 |
| 1.3.4 内质网应激相关蛋白的研究现状 | 第22-23页 |
| 第2章 家蝇MdMtn1 基因的克隆与生物信息学分析 | 第23-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.1.1 昆虫来源 | 第23页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第23页 |
| 2.1.3 主要实验仪器与试剂 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-24页 |
| 2.2.1 总RNA提取和反转录 | 第23页 |
| 2.2.2 金属硫蛋白cDNA的克隆 | 第23-24页 |
| 2.2.3 生物信息学分析 | 第24页 |
| 2.3 实验结果 | 第24-27页 |
| 2.3.1 家蝇金属硫蛋白cDNA的克隆与序列分析 | 第24-26页 |
| 2.3.2 金属硫蛋白的同源比对 | 第26页 |
| 2.3.3 金属硫蛋白分子进化分析 | 第26-27页 |
| 2.4 讨论 | 第27-29页 |
| 第3章 家蝇MdMtn1 基因在应激条件下的表达分析 | 第29-34页 |
| 3.1 实验材料 | 第29页 |
| 3.2 实验方法 | 第29-30页 |
| 3.2.1 总RNA的提取和反转录 | 第29-30页 |
| 3.2.1.1 镉诱导预实验 | 第29-30页 |
| 3.2.1.2 镉刺激实验 | 第30页 |
| 3.2.2 家蝇MdMtn1 基因的荧光定量分析 | 第30页 |
| 3.3 实验结果 | 第30-32页 |
| 3.4 讨论 | 第32-34页 |
| 第4章 家蝇MdMtn1 基因的原核表达及蛋白活性检测 | 第34-39页 |
| 4.1 实验材料 | 第34页 |
| 4.1.1 菌种与质粒 | 第34页 |
| 4.1.2 主要实验仪器与试剂 | 第34页 |
| 4.2 实验方法 | 第34-36页 |
| 4.2.1 MdMtn1 原核表达引物的设计 | 第34页 |
| 4.2.2 MdMtn1 原核表达载体的构建 | 第34-35页 |
| 4.2.3 融合蛋白的原核表达 | 第35页 |
| 4.2.4 融合蛋白的活性检测 | 第35-36页 |
| 4.3 实验结果 | 第36-37页 |
| 4.3.1 金属硫蛋白的原核表达 | 第36页 |
| 4.3.2 金属硫蛋白的活性检测 | 第36-37页 |
| 4.4 讨论 | 第37-39页 |
| 第5章 家蝇SERP1 蛋白的序列分析与基因表达量检测 | 第39-48页 |
| 5.1 实验材料 | 第39页 |
| 5.2 实验方法 | 第39-40页 |
| 5.2.1 SERP1 基本生物学特性分析 | 第39页 |
| 5.2.2 SERP1 蛋白功能预测 | 第39-40页 |
| 5.2.3 总RNA的提取和反转录 | 第40页 |
| 5.2.3.1 菌刺激实验 | 第40页 |
| 5.2.3.2 镉刺激实验 | 第40页 |
| 5.2.4 荧光定量PCR检测及数据分析 | 第40页 |
| 5.3 实验结果 | 第40-46页 |
| 5.3.1 家蝇SERP1 蛋白序列基本性质分析 | 第40-42页 |
| 5.3.2 蛋白功能预测 | 第42-43页 |
| 5.3.3 荧光定量PCR分析 | 第43-46页 |
| 5.3.3.1 菌刺激定量 | 第43-44页 |
| 5.3.3.2 镉刺激定量 | 第44-46页 |
| 5.4 讨论 | 第46-48页 |
| 第6章 家蝇MdSERP1 基因的原核表达及抗体制备 | 第48-52页 |
| 6.1 实验材料 | 第48页 |
| 6.1.1 菌种与质粒 | 第48页 |
| 6.1.2 主要实验仪器与试剂 | 第48页 |
| 6.2 实验方法 | 第48-49页 |
| 6.2.1 MdSERP1 原核表达载体的构建 | 第48页 |
| 6.2.2 MdSERP1 融合蛋白的诱导表达 | 第48页 |
| 6.2.3 融合蛋白表达形式的确定 | 第48-49页 |
| 6.2.4 融合蛋白的纯化 | 第49页 |
| 6.2.5 MdSERP1 抗血清的制备 | 第49页 |
| 6.2.6 Western Blot鉴定 | 第49页 |
| 6.3 实验结果 | 第49-51页 |
| 6.3.1 DsbA-SERP1 融合蛋白的原核表达 | 第49-50页 |
| 6.3.2 Western blot鉴定 | 第50-51页 |
| 6.4 讨论 | 第51-52页 |
| 总结 | 第52-53页 |
| 附录 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第60页 |
