论文目录 | |
| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-33页 |
| · 生物固氮 | 第11-17页 |
| · 生物固氮的方式 | 第11页 |
| · 豆科植物与根瘤菌的共生固氮体系 | 第11-13页 |
| · 参与共生固氮的根瘤菌基因 | 第13-14页 |
| · 参与共生固氮的植物基因 | 第14-17页 |
| · 参与共生固氮的蛋白家族 | 第17-25页 |
| · LTP(Lipid Transfer Protein)家族 | 第18-21页 |
| · DnaJ蛋白家族 | 第21-23页 |
| · 植物受体蛋白激酶 | 第23-24页 |
| · CCP蛋白家族 | 第24-25页 |
| · 研究蛋白互作所涉及的技术 | 第25-28页 |
| · 酵母双杂交系统 | 第25-27页 |
| · 其他蛋白互作技术 | 第27页 |
| · 荧光定量PCR技术(Real time fluorescence quantitative PCR) | 第27-28页 |
| · 紫云英共生固氮相关基因的研究进展 | 第28-30页 |
| · 研究的目的及意义 | 第30-33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-49页 |
| · 材料 | 第33-40页 |
| · 植物材料 | 第33页 |
| · 菌株、质粒与引物 | 第33-36页 |
| · 培养基与营养液 | 第36-37页 |
| · 缓冲液、贮存液和反应试剂 | 第37-39页 |
| · 主要分子生物学试剂 | 第39页 |
| · 主要耗材及使用仪器设备 | 第39-40页 |
| · 方法 | 第40-49页 |
| · 基本分子生物学方法 | 第40页 |
| · 紫云英总RNA的抽提及纯化 | 第40-41页 |
| · RT-PCR和荧光定量PCR | 第41-42页 |
| · AsDJL1基因5'端的扩增 | 第42-43页 |
| · 酵母双杂交有关实验 | 第43-47页 |
| · 蛋白的诱导表达 | 第47-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-78页 |
| · 紫云英根瘤总RNA的抽提及AD-cDNA文库的检测 | 第49-50页 |
| · 紫云英根瘤总RNA的抽提及检测 | 第49页 |
| · AD-cDNA文库的检测 | 第49-50页 |
| · 转脂蛋白AsE246相互作用的蛋白的筛选及初步鉴定 | 第50-70页 |
| · pGBKT7-AsE246诱饵质粒的构建 | 第50-51页 |
| · pGBKT7-AsE246诱饵质粒的检测 | 第51-52页 |
| · 诱饵菌株钓取文库AD-cDNA及阳性克隆子的筛选 | 第52-53页 |
| · 阳性克隆的进一步验证 | 第53-55页 |
| · 阳性克隆pGADT7-cDNA文库质粒测序和分析 | 第55-58页 |
| · 目标基因AsDJL1的时空表达特征研究 | 第58-66页 |
| · 靶基因AsDJL1的同源扩增 | 第66-68页 |
| · 目的基因表达载体的构建及蛋白的诱导 | 第68-70页 |
| · AsE246与其他蛋白的相互作用 | 第70页 |
| · 紫云英共生受体激酶NORK相互作用蛋白的筛选 | 第70-77页 |
| · BD-NORK-PK及BD-NORK-LRR的构建与检测 | 第71-72页 |
| · 诱饵菌株与文库菌株配合筛选阳性克隆 | 第72-73页 |
| · 阳性克隆子测序分析 | 第73-77页 |
| · 蛋白之间相互作用的初步检测 | 第77-78页 |
| 4 总结与讨论 | 第78-82页 |
| · AsE246相互作用蛋白总结与讨论 | 第78-80页 |
| · NORK-PK、NORK-LRR相互作用蛋白的总结与讨论 | 第80-81页 |
| · 进一步的实验设想 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 论文发表情况 | 第95-96页 |
| 附录 | 第96-97页 |
