论文目录 | |
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-23页 |
| 一、抗坏血酸过氧化物酶简介 | 第12-14页 |
| 1 抗坏血酸过氧化物酶的发现 | 第12页 |
| 2 APX 反应机制 | 第12-13页 |
| 3 APX 基因家族简介 | 第13-14页 |
| 二、转基因杨树概述 | 第14-17页 |
| 1 抗虫基因研究 | 第14-15页 |
| · 转 Bt 基因 | 第14页 |
| · 转复合抗虫基因 | 第14-15页 |
| · 转蛋白酶抑制剂基因 | 第15页 |
| · 转蝎神经毒素基因 | 第15页 |
| 2 抗病基因研究 | 第15-16页 |
| · 转抗病毒基因 | 第15页 |
| · 转抗菌基因 | 第15-16页 |
| 3 抗除草剂基因研究 | 第16页 |
| 4 抗胁迫基因研究 | 第16-17页 |
| · 转抗氧化剂基因 | 第16页 |
| · 转抗冻基因 | 第16页 |
| · 转耐盐和抗旱基因 | 第16-17页 |
| 三、启动子概述 | 第17-20页 |
| 1 植物基因启动子简介 | 第17页 |
| 2 启动子功能研究方法 | 第17-20页 |
| · 生物信息学分析法 | 第18-19页 |
| · 实验分析法 | 第19-20页 |
| 3 启动子克隆的意义 | 第20页 |
| 四、杨树基因启动子的克隆方法 | 第20-22页 |
| 1 利用电子克隆的方法克隆启动子 | 第21页 |
| 2 利用 PCR 技术克隆启动子 | 第21-22页 |
| · 普通 PCR | 第21页 |
| · 降落 PCR | 第21-22页 |
| · TAIL-PCR | 第22页 |
| 五、本论文的目的及意义 | 第22-23页 |
| 第二部分 转 cAPX 基因杨树的获得及分子鉴定 | 第23-33页 |
| 一、材料和方法 | 第23-26页 |
| 1 实验材料 | 第23页 |
| 2 实验方法 | 第23-26页 |
| · 毛白杨分化再生体系优化 | 第23-24页 |
| · 农杆菌介导法转化毛白杨 | 第24-25页 |
| · 转基因毛白杨的分子检测 | 第25-26页 |
| · 阳性植株的进一步筛选 | 第26页 |
| 二、结果与分析 | 第26-31页 |
| 1 毛白杨分化再生体系优化 | 第26-29页 |
| · 外植体类型的选择 | 第26-27页 |
| · 分化培养基激素配比对毛白杨组培苗分化率和玻璃化的影响 | 第27-29页 |
| · 琼脂浓度对毛白杨组培苗分化率和玻璃化的影响 | 第29页 |
| · 蔗糖浓度对毛白杨组培苗分化率和玻璃化的影响 | 第29页 |
| 2 毛白杨转化再生植株的获得 | 第29-30页 |
| 3 转基因毛白杨的 PCR 检测 | 第30-31页 |
| 4 阳性植株的进一步筛选 | 第31页 |
| 三、讨论 | 第31-33页 |
| 第三部分 毛白杨 cAPX 基因启动子序列的克隆与分析 | 第33-69页 |
| 一、材料和方法 | 第33-46页 |
| 1 实验材料 | 第33-35页 |
| · 植物材料 | 第33页 |
| · 菌种 | 第33页 |
| · 质粒载体 | 第33页 |
| · 培养基、酶及生化试剂 | 第33-34页 |
| · 引物序列 | 第34-35页 |
| 2 主要仪器设备 | 第35-36页 |
| 3 实验方法 | 第36-46页 |
| · 毛白杨基因组 DNA 的提取（2×CTAB 法） | 第36页 |
| · APX-Ⅱ基因启动子的克隆 | 第36-42页 |
| · APX-Ⅸ基因启动子的克隆 | 第42-44页 |
| · APX-Ⅶ基因启动子的克隆 | 第44-45页 |
| · APX-Ⅲ基因启动子的克隆 | 第45-46页 |
| 4 分析软件 | 第46页 |
| 二、结果与分析 | 第46-67页 |
| 1 毛白杨 APX-Ⅱ基因启动子序列的克隆和序列分析 | 第46-54页 |
| · Ⅱ基因启动子序列的克隆 | 第46-49页 |
| · Ⅱ基因第一次扩增第三轮产物测序结果 | 第49页 |
| · 侧翼未知序列分析 | 第49-54页 |
| 2 毛白杨 APX-Ⅸ基因启动子序列的克隆和序列分析 | 第54-61页 |
| · Ⅸ基因启动子序列的克隆 | 第54-57页 |
| · Ⅸ基因第一次扩增第三轮产物测序结果 | 第57页 |
| · 侧翼未知序列分析 | 第57-61页 |
| 3 毛白杨 APX-Ⅶ基因启动子序列的克隆和序列分析 | 第61-65页 |
| · Ⅶ基因启动子序列的克隆及序列分析 | 第61-62页 |
| · Ⅶ基因第一次扩增第二轮产物测序结果 | 第62页 |
| · 侧翼未知序列分析 | 第62-65页 |
| 4 毛白杨 APX-Ⅲ基因启动子序列的克隆和序列分析 | 第65-67页 |
| · Ⅲ基因启动子序列的克隆 | 第65-67页 |
| · Ⅲ基因第一次扩增第二轮产物测序结果 | 第67页 |
| 三、讨论 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78
页 |
