论文目录 | |
符号说明 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 引言 | 第12-22页 |
· 光对植物生长发育的影响 | 第12-13页 |
· 光和植物种子萌发 | 第12页 |
· 光对植物叶片生长的影响 | 第12页 |
· 光对植物茎生长的影响 | 第12-13页 |
· 光对植物叶绿素合成的影响 | 第13页 |
· 光对花青素合成的影响 | 第13页 |
· 光受体 | 第13-15页 |
· 隐花色素 | 第15-20页 |
· 隐花色素的结构 | 第15-16页 |
· 隐花色素的功能 | 第16-18页 |
· 隐花色素的信号传导 | 第18-20页 |
· 本研究的目的意义 | 第20-22页 |
2 材料与方法 | 第22-43页 |
· 试验材料 | 第22-26页 |
· 植物材料 | 第22页 |
· 植物材料培养与处理 | 第22页 |
· 菌株及载体 | 第22页 |
· 酶、试剂盒、生化试剂、培养基等 | 第22-24页 |
· 仪器与设备 | 第24页 |
2.1.6 PCR 引物 | 第24-26页 |
· 试验方法 | 第26-43页 |
2.2.1 植物总 RNA 的提取 | 第26-27页 |
2.2.2 总 RNA 含量与纯度检测 | 第27页 |
2.2.3 植物 RNA 的纯化(除 DNA)方法 | 第27-28页 |
2.2.4 反转录 cDNA 第一链的合成 | 第28-29页 |
· 反转录产物质量检测 | 第29页 |
2.2.6 cDNA 纯化 | 第29页 |
2.2.7 cDNA 末端加尾 | 第29-30页 |
2.2.8 植物基因组 DNA 的提取及纯化 | 第30-31页 |
· 基因克隆 | 第31-34页 |
· 目的片段的回收 | 第34页 |
· 连接反应 | 第34-35页 |
· 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第35-36页 |
2.2.13 根癌农杆菌 LBA4404 和 GV3101 感受态细胞的制备与转化 | 第36页 |
2.2.14 MdCRY1、MdCRY2 基因载体的构建 | 第36-37页 |
· 酵母双杂交(Yeast-two-hybrid)试验 | 第37-39页 |
· 双分子荧光互补(BiFC)实验 | 第39-40页 |
· 转基因植物材料的获得 | 第40-41页 |
· 转基因植株的生物学鉴定分析 | 第41页 |
· 拟南芥相关指标测定 | 第41-43页 |
3 结果与分析 | 第43-60页 |
3.1 苹果隐花色素基因 MdCRY1 及 MdCRY2 全长 cDNA 的分子克隆 | 第43-44页 |
3.1.1 苹果 MdCRY1 基因的 RACE 扩增和全长 cDNA 序列分离 | 第43-44页 |
3.1.2 苹果 MdCRY2 基因的 RACE 扩增和全长 cDNA 序列分离 | 第44页 |
3.2 苹果 MdCRY1、MdCRY2 基因的序列分析 | 第44-50页 |
3.2.1 MdCRY1、MdCRY2 基因组序列结构分析 | 第44-46页 |
3.2.2 MdCRY1、MdCRY2 氨基酸序列分析及同源关系比对 | 第46-50页 |
3.3 苹果 MdCRY1、MdCRY2 基因的时空表达分析 | 第50-52页 |
3.3.1 MdCRY1 的时空表达分析 | 第50-51页 |
3.3.2 MdCRY2 的时空表达分析 | 第51-52页 |
3.4 苹果 MdCRY1、MdCRY2 基因与拟南芥相应突变体的功能互补 | 第52-58页 |
3.4.1 MdCRY1 与拟南芥 cry1 突变体的功能互补 | 第53-56页 |
3.4.2 MdCRY2 与拟南芥 cry2 突变体的功能互补 | 第56-58页 |
3.5 苹果 MdCRY1、MdCRY2 与拟南芥 AtCOP1 的蛋白互作 | 第58-60页 |
4 讨论 | 第60-62页 |
5 结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-71页 |
致谢 | 第71
页 |