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枯草芽孢杆菌谷氨酰胺转胺酶基因的克隆及表达

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枯草芽孢杆菌谷氨酰胺转胺酶基因的克隆及表达
论文目录
 
摘要第1-5 页
ABSTRACT第5-8 页
1 前言第8-18 页
  · 概述第8-12 页
    · 谷氨酰胺转胺酶第8 页
    · 谷氨酰胺转胺酶的作用机理第8-9 页
    · 谷氨酰胺转胺酶酶活测定方法第9-10 页
    · 谷氨酰胺转胺酶的应用第10-11 页
    · 产谷氨酰胺转胺酶菌株的选育第11 页
    · 国内外研究进展第11-12 页
  · 大肠杆菌表达系统第12-15 页
    · 大肠杆菌表达系统的种类第13-14 页
    · 目的蛋白的表达形式第14 页
    · 包涵体形成的原因第14-15 页
    · 减少包涵体形成的策略第15 页
  · 枯草芽孢杆菌表达系统第15-17 页
    · 枯草芽孢杆菌表达系统的特点第15 页
    · 枯草芽孢杆菌常用的载体第15-16 页
    · 外源蛋白在枯草芽孢杆菌中的分泌表达第16-17 页
  · 本论文的立题依据和研究内容第17-18 页
    · 立题依据第17 页
    · 研究内容第17-18 页
2 材料与方法第18-29 页
  · 实验材料第18-21 页
    · 菌株与质粒第18 页
    · 试剂第18-20 页
    · 主要溶液第20-21 页
    · 培养基第21 页
  · 实验方法第21-29 页
    · 枯草芽孢杆菌DB104染色体DNA的提取第21 页
    · 琼脂糖凝胶电泳第21-22 页
    · DNA纯度和浓度的测定第22 页
    · 大肠杆菌表达载体pET-tg的构建第22-24 页
    · 目的基因在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达第24-25 页
    · 重组质粒pWBTG的构建及转化枯草芽孢杆菌DB104第25-26 页
    · 目的基因在枯草芽孢杆菌DB104中的表达第26 页
    · 大肠杆菌BL21/pET-tg培养条件的优化第26 页
    · 重组蛋白的纯化第26-27 页
    · 酶活测定第27-28 页
    · 谷氨酰胺转胺酶酶学性质第28-29 页
3 结果与讨论第29-51 页
  · 谷氨酰胺转胺酶基因在大肠杆菌中的表达第29-32 页
    · 枯草芽孢杆菌DB104染色体DNA的提取第29 页
    · 染色体DNA纯度和浓度的测定第29-30 页
    · PCR扩增目的基因第30-32 页
  · 重组质粒pET-tg的构建及转化大肠杆菌JM109第32-38 页
    · pET-22b(+)质粒的特性第32-33 页
    · 重组质粒pET-tg的构建第33 页
    · 重组质粒pET-tg转化大肠杆菌JM109第33-36 页
    · 重组质粒pET-tg转化大肠杆菌BL21(DE3)及目的基因的表达第36-38 页
  · 谷氨酰胺转胺酶基因在枯草芽孢杆菌中的表达第38-43 页
    · PCR扩增目的基因第38-39 页
    · 重组质粒pWBTG的构建第39-41 页
    · 重组质粒pWBTG转化枯草芽孢杆菌DB104第41-43 页
    · 谷氨酰胺转胺酶基因的表达第43 页
  · 大肠杆菌BL21/pET-tg培养条件的优化第43-47 页
    · 诱导温度对目的产物表达的影响第43-44 页
    · 诱导时机对目的产物表达的影响第44-45 页
    · 诱导时间对目的产物表达的影响第45-46 页
    · IPTG浓度对表达的影响第46-47 页
  · 谷氨酰胺转胺酶的纯化及酶学性质研究第47-51 页
    · 谷氨酰胺转胺酶的纯化第47-48 页
    · 谷氨酰胺转胺酶的酶学性质第48-51 页
4 结论第51-52 页
5 展望第52-53 页
6 参考文献第53-59 页
7 攻读硕士学位期间发表论文情况第59-60 页
8 致谢第60 页

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