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玉米根系铅胁迫响应microRNA及其靶基因的表达分析
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玉米根系铅胁迫响应microRNA及其靶基因的表达分析
论文目录
 
中文摘要第1-6页
Abstract第6-8页
目录第8-11页
第一部分 文献综述第11-27页
　　1 重金属概述第11-16页
　　　　· 重金属及其危害第11页
　　　　· 土壤重金属污染的来源第11页
　　　　· 重金属铅简介第11-16页
　　　　　　· 铅及铅污染来源第11-12页
　　　　　　· 铅代谢及对人体的危害第12页
　　　　　　· 铅对植物的毒害作用第12-14页
　　　　　　　　· 铅对植物生长发育的影响第12-13页
　　　　　　　　· 铅对植物光合作用的影响第13页
　　　　　　　　· 铅对植物酶活性的影响第13-14页
　　　　　　· 铅胁迫下植物的抗性机理第14-16页
　　　　　　　　· Pb~(2+)的区域化分布第14页
　　　　　　　　· 根系分泌物的影响第14页
　　　　　　　　· 限制Pb~(2+)的跨膜运输第14-15页
　　　　　　　　· 重金属螯合蛋白的解毒作用第15页
　　　　　　　　· 抗氧化系统的防御作用第15-16页
　　2 植物miRNA概述第16-25页
　　　　· 植物miRNA的发现第16页
　　　　· 植物miRNA的生物合成机制第16-17页
　　　　· 植物miRNA的作用机制第17页
　　　　· 植物miRNA的特征第17-18页
　　　　· 植物miRNA的研究方法第18-22页
　　　　　　· 植物miRNA的筛选第18-19页
　　　　　　· 植物miRNA的表达检测第19-22页
　　　　　　　　2.5.2.1 Northern杂交(Northern blotting)第19页
　　　　　　　　2.5.2.2 原位杂交(in situ hybridization,ISH)第19-20页
　　　　　　　　2.5.2.3 miRNA芯片(miRNA chip)第20页
　　　　　　　　2.5.2.4 实时荧光定量PCR(Real-time fluorescent quantitative PCR)第20-22页
　　　　· 植物miRNA靶基因的研究方法第22-24页
　　　　　　· 靶基因的寻找第22-23页
　　　　　　· 靶基因的真实性验证第23-24页
　　　　· 植物重金属胁迫相关miRNA的研究进展第24-25页
　　3 本研究的目的与意义第25-26页
　　4 实验技术路线第26-27页
第二部分 材料与方法第27-40页
　　1 实验材料第27-30页
　　　　· 供试玉米材料第27页
　　　　· 主要试剂第27-28页
　　　　　　· 试剂盒第27页
　　　　　　· 酶类及生化试剂第27页
　　　　　　· 主要试剂配方第27-28页
　　　　· PCR引物第28-29页
　　　　　　· miRNA的荧光定量PCR引物第28页
　　　　　　· miRNA靶基因的半定量RT-PCR引物第28-29页
　　　　· 使用的数据库及软件第29页
　　　　· 实验主要仪器设备第29-30页
　　2 实验方法第30-40页
　　　　· 样品的制备与获得第30-34页
　　　　　　· 材料的培养与处理第30-31页
　　　　　　· 样品总RNA的提取第31-32页
　　　　　　· 样品总RNA的cDNA模板制备第32-33页
　　　　　　· 样品miRNA的cDNA模板制备第33-34页
　　　　· miRNA的靶基因预测第34页
　　　　· 引物设计及合成第34页
　　　　· miRNA的真实性鉴定第34-35页
　　　　· miRNA的荧光定量PCR检测第35-36页
　　　　　　· 标准品的制备及标准曲线的制作第35页
　　　　　　· 实时荧光定量PCR(FQ-PCR)第35页
　　　　　　· 统计分析第35-36页
　　　　· miRNA靶基因的半定量RT-PCR检测第36-38页
　　　　　　· 引物的特异性检测第36页
　　　　　　· PCR反应条件的优化第36-37页
　　　　　　· 各样品模板浓度的均一化第37页
　　　　　　· 半定量RT-PCR检测第37-38页
　　　　· 主要抗氧化酶的酶活测定第38-40页
　　　　　　· 粗酶液的提取第38页
　　　　　　· SOD活性的测定第38页
　　　　　　· POD活性的测定第38-40页
第三部分 结果与分析第40-59页
　　1 总RNA的提取与逆转录效果检测第40-41页
　　　　· 总RNA的提取效果检测第40页
　　　　· 总RNA逆转录的基因组cDNA检测图第40-41页
　　　　· miRNA加尾逆转录的cDNA检测图第41页
　　2 miRNA的定量表达分析第41-50页
　　　　· miRNA的真实性鉴定第41-42页
　　　　· 荧光定量标准曲线第42-43页
　　　　· 荧光定量熔解曲线第43-44页
　　　　· miRNA的相对定量表达分析第44-50页
　　　　　　· zma-miR156b的相对表达量第45页
　　　　　　· zma-miR156k的相对表达量第45-46页
　　　　　　· zma-miR156new~*的相对表达量第46页
　　　　　　· zma-miR166d的相对表达量第46-47页
　　　　　　· zma-miR167c的相对表达量第47页
　　　　　　· zma-miR167f的相对表达量第47-48页
　　　　　　· zma-miR168b的相对表达量第48页
　　　　　　· zm-miR171d/e/i/j的相对表达量第48-49页
　　　　　　· zma-miR319的相对表达量第49页
　　　　　　· zma-miR28a~*的相对表达量第49-50页
　　　　　　· zma-miR51~*的相对表达量第50页
　　3 miRNA的靶基因预测结果第50-54页
　　4 miRNA靶基因的半定量RT-PCR分析第54-57页
　　　　· 各样品模板均一化第54页
　　　　· miRNA靶基因半定量RT-PCR结果第54-57页
　　5 主要抗氧化酶的酶活分析第57-59页
　　　　· SOD酶活分析第57页
　　　　· POD酶活分析第57-59页
第四部分 讨论第59-65页
　　1 miRNA表达检测方法的比较第59页
　　2 重金属Pb胁迫下miRNA介导的表达调控分析第59-62页
　　3 主要抗氧化酶对Pb胁迫的响应特点第62页
　　4 miRNA介导的玉米抗Pb胁迫分子机制探讨第62-64页
　　5 今后的研究方向第64-65页
第五部分 结论第65-66页
参考文献第66-74页
致谢第74-75 页

本篇论文共75页，点击这进入下载页面。
 
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