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PEDV部分N基因的原核表达和间接ELISA方法的建立

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PEDV部分N基因的原核表达和间接ELISA方法的建立
论文目录
 
摘要第11-12页
Abstract第12-13页
第一章 引言第13-26页
  · 病原学第13-16页
    · 分类第13-14页
    · 结构和基因组第14-16页
    · 生物学和物理化学性质第16页
    · 病毒分离培养第16页
  · 流行病学第16-18页
    · 世界流行情况第16-17页
    · 美国流行情况第17-18页
    · 传播第18页
  · 发病机制第18-20页
    · 组织嗜性第18-19页
    · 病毒肠道复制第19页
    · 病理生理学第19页
    · 抵抗PED的年龄因素第19页
    · 急性病毒血症第19-20页
    · 免疫应答第20页
    · 病毒衰减第20页
  · 流行性PED与地方性PED第20-21页
    · 流行性PED第20-21页
    · 地方性PED和细菌病毒共感染第21页
  · 病变第21-22页
    · 眼观病变第21-22页
    · 组织学病变第22页
  · 免疫预防第22-23页
    · 流行病PED第22页
    · 地方性PED第22-23页
  · 诊断第23页
  · 疫苗第23-24页
  · 治疗第24-25页
  · 总结第25页
  · 本研究的特色第25-26页
第二章 PEDV部分N基因的原核表达及表达产物的反应原性分析第26-50页
  · 试验材料第26-29页
    · 病毒第26页
    · 菌株第26页
    · 载体第26页
    · RNA提取及PCR主要试剂第26页
    · 工具酶第26-27页
    · 蛋白质分子量标准第27页
    · 试剂盒第27页
    · 蛋白印迹转移膜第27页
    · 溶液第27-28页
    · 主要仪器第28-29页
  · 试验方法第29-42页
    · PEDV N-450基因合成第29-32页
    · 构建克隆载体PMDTM18-T-N450DH5α第32-36页
    · 表达载体构建第36-39页
    · 表达载体在大肠杆菌中诱导表达第39-41页
    · 蛋白纯化工艺研究第41-42页
    · Western blotting分析第42页
  · 试验结果第42-48页
    · N-450基因PCR第42页
    · 克隆载体的构建第42-44页
    · 表达载体的构建第44-45页
    · 重组表达载体的诱导表达第45-46页
    · 重组表达载体的可溶性鉴定第46-47页
    · 表达蛋白的纯化第47-48页
    · Western blotting检测第48页
  · 讨论第48-50页
    · 目的基因的选择第48-49页
    · 感受态细胞的选择第49页
    · 诱导条件优化第49页
    · 染料选择第49-50页
第三章 PEDV流行株部分N基因重组蛋白的间接ELISA方法建立第50-60页
  · 材料第50页
  · 方法第50-54页
    · 测定蛋白浓度第50-51页
    · 洗脱液透析浓缩第51页
    · 间接ELISA方法的建立第51-53页
    · rnPED-ELISA性能评价第53-54页
  · 结果第54-57页
    · 蛋白浓度测定结果第54页
    · 重组N蛋白的定量分析第54页
    · rnPED-ELISA试验条件摸索第54-56页
    · SN试验相关性分析第56页
    · 与商品化试剂盒比较第56-57页
    · 流行病学调查第57页
  · 讨论第57-60页
    · ELISA工作条件的确定第58页
    · 抗原的纯度对ELISA的影响第58页
    · 临床检测结果第58-60页
第四章 结论第60-61页
参考文献第61-70页
附录第70-71页
致谢第71-72页
攻读学位期间发表论文的目录第72页

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