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重组菌株合成类胡萝卜素的研究

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重组菌株合成类胡萝卜素的研究
论文目录
 
中文摘要第1-7 页
英文摘要第7-2 页
目录第2-8 页
前言第8-13 页
材料与方法第13-27 页
  一、 菌株与质粒第13 页
  二、 培养基第13-14 页
    1. LB培养基第13 页
    2. 玉米粉培养基第13-14 页
    3. 糖蜜培养基第14 页
  三、 试剂第14-16 页
  四、 仪器设备第16 页
  五、 重组菌株的构建第16-20 页
    1. GGPS基因的PCR扩增第16-17 页
    2. 制备大肠杆菌DH10B感受态细胞第17 页
    3. 质粒转化第17-18 页
    4. 抽提质粒第18-19 页
    5. 琼脂糖凝胶电泳第19-20 页
  六、 重组菌株显色最佳条件及与对照菌株的对比第20-21 页
    1. 重组菌株的平板培养第20 页
    2. 重组菌株的液体培养第20-21 页
    3. 与对照菌株的对比第21 页
  七、 产类胡萝卜素黄色菌株的筛选第21-22 页
  八、 重组菌株类胡萝卜素的抽提第22-23 页
    1. 研磨破壁萃取法第22 页
    2. 盐酸破壁溶剂萃取法第22 页
    3. 类胡萝卜素含量的计算第22-23 页
  九、 重组菌株产类胡萝卜素的最佳条件第23-25 页
    1. LB培养基培养重组菌株第23 页
    2. 重组菌、对照菌和原始菌在LB培养基中生长曲线的测定第23 页
    3. 玉米粉培养基培养重组菌株第23-24 页
    4. 糖蜜培养基培养重组菌株第24 页
    5. 重组菌株在糖蜜培养基中生长曲线的测定第24 页
    6. 通气量对重组菌株色的影响第24-25 页
  十、 小型发酵罐培养重组菌株第25-26 页
    1. 1 L发酵罐培养条件优化及生长曲线的测定第25 页
    2. 3L发酵罐培养条件优化及生长曲线的测定第25-26 页
  十一、薄板层析第26-27 页
    1. 展层剂的选择第26 页
    2. 薄板层析第26-27 页
结果第27-46 页
  一、 重组菌株的获得第27-29 页
    1. 载体质粒的选取第27-28 页
    2. 质粒的体外重组第28-29 页
    3. 琼脂糖凝胶电泳第29 页
  二、 重组菌株显色最佳条件及与对照菌株的对比第29-32 页
    1. 平板显色的最佳条件第29-30 页
    2. 重组菌株与对照菌株的对比第30 页
    3. 液体培养显色的最佳条件第30-32 页
  三、 产类胡萝卜素黄色菌株的筛选第32-33 页
  四、 重组菌株类胡萝卜素抽提方法的优化第33-34 页
    1. 研磨破壁萃取法第33 页
    2. 盐酸破壁溶剂萃取法第33-34 页
  五、 重组菌株产类胡萝卜素的最佳条件第34-41 页
    1. LB培养基培养重组菌株第34-35 页
    2. 重组菌株、原始菌株(大肠杆菌)和对照菌株的生长曲线第35-37 页
    3. 玉米粉培养基的最佳培养条件第37-38 页
    4. 糖蜜培养基的最佳培养条件第38-40 页
    5. 糖蜜培养基培养重组菌株的生长曲线第40 页
    6. 摇瓶培养的最佳通气量第40-41 页
  六、 小型发酵罐试验结果第41-44 页
    1. 1L发酵罐培养第41-43 页
    2. 3L发酵罐培养第43-44 页
  七、 薄板层析第44-46 页
    1. 合适展层剂的选择第44 页
    2. 薄板层析第44-46 页
讨论第46-58 页
  一、 类胡萝卜素的生物合成途径第46-49 页
  二、 重组菌的构建及表达第49-51 页
    1. 重组菌外源基因的表达第49-50 页
    2. 重组菌质粒稳定性第50-51 页
  三、 重组菌类胡萝卜素的最佳抽提方法第51-52 页
  四、 重组菌最佳发酵条件第52-55 页
    1. 玉米粉浓度第53 页
    2. 糖蜜浓度第53 页
    3. 培养温度第53-54 页
    4. pH值第54 页
    5. 加诱导剂IPTG前的培养时间第54 页
    6. 通气量第54-55 页
    7. 培养时间第55 页
  五、 小型发酵罐试验第55-56 页
  六、 重组菌类胡萝卜素成分分析第56-57 页
  七、 结束语第57-58 页
附页第58-59 页
参考文献第59-63 页
致谢第63 页

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