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重楼不同部位药用成分分析及SQS基因的原核表达分析
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重楼不同部位药用成分分析及SQS基因的原核表达分析
论文目录
 
摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
第一章 前言第11-19页
　　1 重楼属植物概况第11-13页
　　　　· 重楼属植物的研究进展第11页
　　　　· 重楼的药理作用第11-12页
　　　　　　· 抗肿瘤作用第11页
　　　　　　· 止血作用第11-12页
　　　　　　· 免疫调节研究第12页
　　　　　　· 镇静镇痛研究第12页
　　　　　　· 心血管作用第12页
　　　　　　· 其他作用第12页
　　　　· 重楼属植株中含有的化学成分第12-13页
　　2 重楼甾体皂苷的提取和HPLC检测第13-15页
　　　　· 重楼中甾体皂苷合成的研究进展第13-15页
　　　　· 重楼甾体皂苷与皂苷元的提取工艺第15页
　　　　· HPLC法在重楼甾体皂苷检测中的应用第15页
　　3 重楼属植株关键酶基因的克隆与原核表达第15-17页
　　　　· 重楼甾体皂苷合成途径中关键酶基因的研究进展第15-17页
　　　　· 原核表达载体的构建及表达条件优化第17页
　　4 本研究的目的、意义与思路第17-19页
　　　　· 本实验的目的与意义第17-18页
　　　　· 本实验的主要内容与思路第18-19页
第二章 重楼根、茎、叶和果实中药用成分分析第19-35页
　　1 引言第19页
　　2 材料第19-20页
　　　　· 材料与试剂第19-20页
　　　　　　· 材料第19页
　　　　　　· 试剂第19-20页
　　　　· 主要仪器与设备第20页
　　3 方法第20-22页
　　　　· 甾体皂苷的提取与检测第20-21页
　　　　　　· 不同提取甾体皂苷方法的比较第20页
　　　　　　· 提取重楼中的甾体皂苷第20页
　　　　　　· 色谱条件的优化第20页
　　　　　　· HPLC检测重楼甾体皂苷第20页
　　　　　　· 标准品溶液的制备及线性关系考察第20-21页
　　　　　　· 线性关系考察第21页
　　　　　　· 色谱仪的精密度和稳定性分析第21页
　　　　　　· 重复性和回收率实验第21页
　　　　· 薯蓣皂苷元的提取与检测第21-22页
　　　　　　· 供试品溶液的制备第21页
　　　　　　· 色谱条件第21页
　　　　　　· 标准品溶液的制备及线性关系考察第21页
　　　　　　· 色谱仪的精密度和稳定性考察第21页
　　　　　　· 重复性和回收率实验第21-22页
　　4 结果与讨论第22-34页
　　　　· 四种重楼不同部位重楼皂苷I、II、VI、VII含量的检测第22-30页
　　　　　　· 甾体皂苷提取方法的选取第22页
　　　　　　· HPLC检测重楼中甾体皂苷色谱条件的优化第22页
　　　　　　· 四种重楼皂苷标准品的HPLC检测及标准曲线的制备第22-24页
　　　　　　· 色谱仪的精密度和稳定性分析第24页
　　　　　　· 重复性和回收率实验第24页
　　　　　　· 样品含量测定与分析第24-30页
　　　　· 四种重楼不同部位薯蓣皂苷及皂苷元含量的检测第30-34页
　　　　　　· 薯蓣皂苷标准品及标准曲线的制备第30页
　　　　　　· HPLC检测样品薯蓣皂苷的含量第30-31页
　　　　　　· 薯蓣皂苷元标准品HPLC谱图和标准曲线的制备第31页
　　　　　　· 精密度和稳定实验第31页
　　　　　　· 重复性和回收率实验第31-32页
　　　　　　· HPLC检测样品薯蓣皂苷元的含量第32-34页
　　5 结论第34-35页
第三章 华重楼关键酶SQS基因的克隆与原核表达第35-55页
　　1 引言第35页
　　2 材料与试剂第35-36页
　　　　· 材料第35页
　　　　· 主要试剂第35-36页
　　　　· 培养基第36页
　　3 主要仪器设备第36页
　　4 方法第36-43页
　　　　· 华重楼SQS基因的克隆第36-39页
　　　　　　· 华重楼种子快繁第36页
　　　　　　· 华重楼叶片总RNA的提取及RNA浓度测定第36页
　　　　　　· 制备第一链cDNA第36-37页
　　　　　　· 华重楼SQS基因ORF框序列的PCR扩增第37页
　　　　　　· 电泳及DNA片段回收第37页
　　　　　　· 目的片段与克隆载体的连接第37-38页
　　　　　　· E.coli DH5α感受态细胞的制备第38页
　　　　　　· 连接产物的转化第38页
　　　　　　· 菌液PCR鉴定及测序第38-39页
　　　　· 生物信息学分析第39页
　　　　· 华重楼SQS基因的原核表达第39-43页
　　　　　　· 碱变性法提取华重楼质粒DNA第39-40页
　　　　　　· 原核表达载体构建第40-41页
　　　　　　· 重组质粒在E.coliBl21中的表达第41-43页
　　　　　　　　· SDS-PAGE第41-42页
　　　　　　　　· 表达条件的优化第42-43页
　　·结果与分析第43-54页
　　　　· 华重楼总RNA的提取第43页
　　　　· 华重楼SQS基因cDNA的克隆第43-46页
　　　　· 华重楼SQS基因生物信息学分析第46-50页
　　　　· 华重楼SQS基因的原核表达第50-54页
　　　　　　· 碱变性法提取华重楼SQS基因质粒DNA第50页
　　　　　　· 华重楼SQS基因原核表达载体构建第50-52页
　　　　　　· 重组质粒在E.coli Bl21中的表达条件的优化第52-54页
　　6 讨论第54-55页
全文总结第55-57页
参考文献第57-62页
致谢第62-63页
附录A:攻读硕士学位期间所发表的学术论文目录第63页

本篇论文共63页，点击这进入下载页面。
 
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