环介导等温扩增(LAMP)技术快速检测食品中金黄色葡萄球菌的研究
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环介导等温扩增(LAMP)技术快速检测食品中金黄色葡萄球菌的研究
论文目录
摘要
第1-6页
Abstract
第6-11页
1 引言
第11-33页
· 立题背景及意义
第11-12页
· 金葡菌的简介
第12-15页
· 金葡菌的发现历史
第12页
· 金葡菌的基本特征
第12页
· 金葡菌的致病性
第12-13页
· 金葡菌的流行病学
第13页
· 金葡菌食物中毒
第13-14页
· 与金葡菌食物中毒相关的食物
第14-15页
· 金葡菌污染的控制
第15页
· 金葡菌检测方法研究现状
第15-20页
· 传统分离鉴定方法
第15-16页
· 快速鉴别培养基
第16-17页
· 微型化生化试剂盒
第17页
· 免疫学检测方法
第17页
· 分子生物学检测方法
第17-19页
· 其他检测方法
第19-20页
· 环介导等温扩增(LAMP)技术
第20-32页
· LAMP 法的概述
第20页
· LAMP 法的特点
第20-21页
· LAMP 法的引物设计
第21-23页
· LAMP 法的基本原理
第23-27页
· LAMP 的反应体系
第27-28页
· LAMP 法产物的检测方法
第28-29页
· LAMP 法的应用
第29-32页
· 研究内容
第32-33页
2 材料与方法
第33-46页
· 试验材料与仪器
第33-35页
· 试验菌株
第33页
· 仪器与设备
第33-34页
· 主要培养基
第34页
· 生化试剂
第34-35页
· 试验样品
第35页
· 试验方法
第35-36页
· 菌种的保藏、活化和培养
第35-36页
· 细菌DNA 模板的提取
第36页
· LAMP 引物设计、反应体系及主要操作
第36-38页
· 引物设计
第36-37页
· LAMP 和PCR 反应体系
第37-38页
· LAMP 和PCR 主要操作程序
第38页
· LAMP 反应条件优化
第38-39页
· 适宜镁离子浓度选择
第38页
· Bst DNA 聚合酶对试验结果的影响
第38-39页
· 适宜dNTPs 浓度选择
第39页
· 反应时间的优化
第39页
· 反应温度的优化
第39页
· 引物对LAMP 反应的影响分析
第39页
· 甜菜碱LAMP 反应的影响
第39页
· LAMP 引物特异性的检测
第39-40页
· 金葡菌的灵敏度检测
第40页
· LAMP 反应的灵敏度检测
第40页
· PCR 反应的灵敏度检测
第40页
· LAMP 扩增产物的分析
第40-41页
· LAMP 扩增产物的可视结果分析
第40页
· LAMP 扩增产物的凝胶成像分析
第40页
· LAMP 扩增产物酶切结果分析
第40-41页
· 人工污染食品中金葡菌基因组DNA 提取方法比较
第41-44页
· 溶剂提取热裂解法
第41页
· FDA 提取DNA 法
第41-42页
· 化学试剂法
第42页
· 溶剂提取酶解法
第42页
· 试剂盒法
第42-43页
· FTA 滤膜法
第43页
· 蛋白酶K 法
第43-44页
· 普通热裂解法
第44页
· 人工污染金葡菌食品的检测试验
第44-45页
· 人工污染肉及肉制品样品中金葡菌DNA 的提取、检测
第44页
· 人工污染乳品样品中金葡菌DNA 的提取、检测
第44-45页
· 实际样品检测试验
第45-46页
3 结果与分析
第46-59页
· LAMP 反应条件的优化
第46-50页
· 镁离子浓度的优化
第46页
· Bst DNA 聚合酶的优化
第46-47页
· dNTPs 浓度的优化
第47-48页
· 反应时间的优化
第48-49页
· 反应温度的优化
第49页
· 引物缺省试验
第49-50页
· 甜菜碱对LAMP 反应的影响
第50页
· LAMP 引物特异性的研究
第50-51页
· LAMP 扩增产物的分析
第51-52页
· 食品中金葡菌DNA 提取方法的比较
第52-54页
· LAMP 和PCR 检测金葡菌的灵敏度
第54-55页
· 人工污染食品中金葡菌检出限的研究
第55-58页
· 实际食品样品LAMP 检测试验
第58-59页
4 讨论
第59-63页
· 环介导等温扩增(LAMP)方法检测金葡菌方法学评价
第59页
· 靶基因的选择
第59页
· LAMP 引物的确定
第59-60页
· LAMP 反应条件的优化
第60-61页
· DNA 聚合酶
第60页
· 镁离子浓度
第60-61页
· dNTPs 浓度
第61页
· 温度对LAMP 的影响
第61页
· 食品中金葡菌提取方法的比较
第61-62页
· LAMP 方法实际样品检测试验
第62页
· LAMP 方法发展展望
第62-63页
5 结论
第63-64页
参考文献
第64-71页
附录A
第71-72页
硕士期间发表学术论文
第72-73页
作者简介
第73-74页
致谢
第74-75页
本篇论文共
75
页,
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