Taq DNA 聚合酶耐热域的克隆及分析



Taq DNA 聚合酶耐热域的克隆及分析

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Taq DNA 聚合酶耐热域的克隆及分析

论文目录
摘要	第1-5页
ABSTRACT	第5-10页
第一章耐热蛋白及蛋白标签的研究进展	第10-19页
· 耐热蛋白的研究	第10-11页
· 耐热蛋白	第10-11页
· Taq DNA聚合酶	第11-14页
· Taq DNA聚合酶的发现	第11-12页
1.2.2. Taq DNA聚合酶的特性	第12-14页
1.2.3. Taq DNA聚合酶基因	第14页
· 蛋白标签	第14-17页
· 蛋白标签的发现	第15-17页
· 耐热蛋白标签及热纯化	第17-19页
第二章 Taq DNA聚合酶耐热域的克隆及分析	第19-50页
· 引言	第19-20页
· 实验材料	第20-22页
· 细菌菌株及常用试剂	第20页
· 质粒及基因	第20页
· 载体及重组载体图谱	第20-22页
· 方法	第22-38页
· 耐热蛋白基因表达载体的构建	第22-24页
· 蛋白表达的大肠杆菌宿主	第24-25页
· 重组质粒的热激转化	第25页
· 重组质粒的提取与保存	第25-26页
· 目的蛋白的诱导表达	第26-27页
· 蛋白浓度测定(BCA方法)	第27-28页
· 蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳检测	第28-30页
· Taq DNA聚合酶基因的获得	第30页
· 亚克隆Taq DNA基因	第30-31页
· Taq DNA聚合酶基因亚克隆8个片段的诱导表达	第31页
· 亚克隆重组载体蛋白的抽提与纯化	第31页
· 亚克隆蛋白片段的聚丙烯酰胺凝胶电泳	第31-32页
· H标签荷载非耐热蛋白的耐热性检测	第32页
· 6xHis蛋白的纯化	第32-33页
· 纯化蛋白的浓缩和透析	第33-34页
· 蛋白的ELISA检测	第34-35页
· 蛋白的WESTERN BLOT检测	第35-37页
· 蛋白二级结构的圆二色谱检测	第37页
· 小鼠免疫实验	第37-38页
· 结果	第38-47页
· PCR产物琼脂糖凝胶电泳检测	第38页
· 重组质粒琼脂糖凝胶电泳检测	第38-39页
· 标签H嵌合蛋白及32A的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的检测	第39-40页
· 标签H嵌合蛋白及32A的WESTERN BLOT检测	第40-41页
· 标签H嵌合蛋白及32A的ELISA检测	第41-44页
· 标签H嵌合蛋白及32A的圆二色谱(CD)检测	第44-46页
· 纯化蛋白免疫小鼠的效价测定	第46-47页
· 讨论	第47-50页
参考文献	第50-56页
附录A 英文缩略词	第56-57页
附录B 主要试剂(盒)及生产厂家	第57-59页
附录C 主要仪器设备及生产厂家	第59-60页
攻读学位期间取得的研究成果	第60-61页
致谢	第61-62 页

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