论文目录 | |
| 摘要 | 第1-6
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| Abstract | 第6-11
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| 第一章 文献综述 | 第11-19
页 |
| 1 小麦的穗发芽 | 第11
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| 2 植物的休眠 | 第11-12
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| 3 植物休眠在农作物中的意义 | 第12
页 |
| 4 影响植物休眠的主要遗传因素 | 第12-13
页 |
| · 穗发芽QTLs研究 | 第12-13
页 |
| · 植物激素与休眠 | 第13
页 |
| 5 种子休眠和ABA | 第13-16
页 |
| · ABA的代谢途径 | 第14-15
页 |
| · CYP707A基因家族与ABA代谢 | 第15-16
页 |
| 6 ABA的效应基因与植物休眠 | 第16-17
页 |
| 7 研究的目的意义 | 第17-18
页 |
| 8 研究技术路线 | 第18-19
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| 第二章 材料与方法 | 第19-34
页 |
| 1 试验材料 | 第19-20
页 |
| · 植物材料 | 第19
页 |
| · 菌种和质粒 | 第19
页 |
| · 主要试剂和仪器 | 第19-20
页 |
| · 主要试剂 | 第19
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| · 主要仪器 | 第19-20
页 |
| 2 试验方法 | 第20-34
页 |
| · 菌种的培养和保存 | 第20
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| · 大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第20-21
页 |
| · 感受态胞的制备和转化 | 第21-23
页 |
| · 大肠感菌感受态细胞的制备和转化 | 第21-22
页 |
| · 农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第22-23
页 |
| · DNA片断的回收 | 第23-24
页 |
| · 酶切产物的纯化 | 第23-24
页 |
| · DNA快速纯化 | 第24
页 |
| · 植物总RNA提取 | 第24-25
页 |
| · PCR | 第25-26
页 |
| · rTaq PCR反应 | 第25-26
页 |
| · Phusion PCR反应 | 第26
页 |
| · RT-PCR | 第26-27
页 |
| · 植物基因组DNA的提取 | 第27-28
页 |
| · 拟南芥基因组DNA的快速提取法 | 第27-28
页 |
| · 小麦叶片DNA的提取法 | 第28
页 |
| · 拟南芥种子的消毒与铺板 | 第28-29
页 |
| · 拟南芥的转化 | 第29-30
页 |
| · 拟南芥种子的萌发实验 | 第30
页 |
| · GUS染色 | 第30-31
页 |
| · 小麦转化 | 第31-32
页 |
| · 小麦种子的消毒处理 | 第31
页 |
| · 小麦种子的春化 | 第31
页 |
| · 农杆菌的活化 | 第31-32
页 |
| · 农杆菌介导的小麦转化 | 第32
页 |
| · 转基因小麦的检测 | 第32-33
页 |
| · 转基因小麦T_0植株的筛选 | 第32
页 |
| · 转基因小麦T_1植株的检测 | 第32-33
页 |
| · 培养基的配制 | 第33-34
页 |
| 第三章 结果与分析 | 第34-53
页 |
| · HvABA8' OH-1基因的互补实验 | 第34-41
页 |
| · 载体构建 | 第34-37
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| · AtCYP707A2基因启动子的克隆 | 第34
页 |
| · HvABA8'OH-1基因全长cDNA的扩增与克隆 | 第34-36
页 |
| · GUS基因的扩增与克隆 | 第36-37
页 |
| · 拟南芥的转化及分析 | 第37-41
页 |
| · A2pro-OH1转基因拟南芥及萌发率分析 | 第37-38
页 |
| · A2-pro-GUS转基因拟南芥及表达组织分析 | 第38-41
页 |
| · HvABA8'OH-1基因RNAi载体的构建 | 第41-50
页 |
| · 大麦种子Total RNA的提取 | 第41
页 |
| · pGlub启动子,Nos终止子,内含子的PCR扩增 | 第41-42
页 |
| · 大麦HvABA8'OH-1基因保守序列和特异序列的选取 | 第42-45
页 |
| · 大麦HvABA8'OH-1基因保守序列和特异序列的RT-PCR扩增 | 第45-46
页 |
| · HvABA8'OH-1基因RNAi载体的构建及验证 | 第46-50
页 |
| · 农杆菌介导的小麦茎端转化及转基因小麦的鉴定 | 第50-53
页 |
| · RNAi载体转化农杆菌 | 第50
页 |
| · 小麦茎尖生长点转化及其鉴定 | 第50-53
页 |
| 第四章 讨论 | 第53-56
页 |
| · HvABA8'OH-1基因的功能验证 | 第53
页 |
| · AtCYP707A2基因启动子的组织表达特性 | 第53-54
页 |
| · 提高小麦穗发芽抗性的途径 | 第54
页 |
| · 小麦转化外植体的选择以及转化中存在的问题 | 第54-56
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| 小结 | 第56-57
页 |
| 参考文献 | 第57-64
页 |
| 附录 攻读学位期间发表的学术论文 | 第64-65
页 |
| 图版说明 | 第65-66
页 |
| 致谢 | 第66
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